【摘 要】
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目的:观察人参三七川芎提取物延缓自发性高血压大鼠(Spontaneously Hypertension Rats, SHR)血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)衰老的作用及其可能的细胞周期调控机制.方法:采用原代细胞培养的方法建立SHR大鼠VMSC模型,实验分为WKY对照组、SHR模型组、缬沙坦(Valsartan)组、中药低剂量组和中药高剂量组
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目的:观察人参三七川芎提取物延缓自发性高血压大鼠(Spontaneously Hypertension Rats, SHR)血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)衰老的作用及其可能的细胞周期调控机制.方法:采用原代细胞培养的方法建立SHR大鼠VMSC模型,实验分为WKY对照组、SHR模型组、缬沙坦(Valsartan)组、中药低剂量组和中药高剂量组.采用衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-gal)染色法观察细胞衰老情况,流式细胞仪分析细胞周期,RT-PCR和Western Bloting法检测各组细胞p16、cyclinD1、CDK4和Rb的mRNA和蛋白表达.结果:SA-β-gal染色显示,与WKY组比较,SHR组SA-β-gal阳性细胞明显增多(P<0.01),人参三七川芎提取物可使SHR大鼠VSMCs SA-β-gal阳性细胞明显减少(P<0.01);流式细胞仪检测细胞周期,与WKY组比较,SHR组在G1期明显减少,S期细胞明显增加,中药干预后SHR大鼠的VSMCs G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少(P<0.05);RT-PCR检测显示,与WKY组比较,SHR组VSMC的p16和Rb mRNA表达量明显减少,cyclinD1和CDK4 mRNA表达增加;人参三七川芎提取物干预后SHR大鼠VSMCs p16和Rb mRNA表达量增加,cyclinD1和CDK4mRNA减少.Western-Blot显示,与WKY组比较,SHR组VSMC的p16蛋白表达量明显减少,cyclinD1、CDK4和pRb蛋白表达量明显增加(P<0.05);中药干预后SHR大鼠VSMCs p16蛋白表达增加,cyclinD1、CDK4和pRb蛋白表达量减少(P<0.05).结论:人参三七川芎提取物可能通过改变p16-CyclinD/CDK-Rb通路因子的表达而发挥其延缓SHR大鼠VSMCs衰老的作用.
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