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目的：采用GatewayTM 技术构建人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)基因重组腺病毒载体,并检测其rhBMP-2 的表达.方法：从携带人hBMP-2 基因片段的pcDNA3.1 质粒中获取目的基因hBMP-2 片段,将目的基因片段插入至入门载体pENTRTM11 中,形成入门克隆(命名为pENTRTM11/BMP-2),将pENTRTM11/BMP-2 与目的载体Ad/CMV/V5-DEST 在高效重组酶作用下发生体外重组形成表达克隆ad-BMP-2,线性转化后,再转入293A 细胞里包装,获得人骨形态发生蛋白－2 的基因重组腺病毒株Ad-hBMP-2,进一步将其在293A 细胞中扩增,用TCID50 方法计算病毒滴度,使用Western Blot 技术分析目的蛋白表达情况.结果：ad-BMP-2 经酶切证实有目的基因的插入片段.酶切、PCR 及测序鉴定证实BMP-2 基因重组腺病毒载体构建成功,并在293A 细胞中包装成功,获得成熟的病毒颗粒,测得病毒滴度为2.5×109pfu/ml,Western Blot 结果证实Ad-hBMP-2 在293A 细胞中高效表达rhBMP-2 蛋白.结论：利用λ 噬菌体的位点特异性重组系统成功构建了Ad-hBMP-2,为进一步研究BMP-2 的生理功能和利用BMP-2 的骨基因治疗奠定了实验基础.