人参皂苷Rg1对大鼠脑皮质神经细胞保护作用机制的研究

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人参皂苷Rg1是从人参中提取的有效成分,可以保护神经细胞由KCl和谷氨酸引起的毒性作用。本实验旨在观察人参皂苷Rg1对原代培养的大鼠胎鼠脑皮质神经细胞凋亡的抑制作用。方法采用孕期18 d的Wistar大鼠,无菌条件下取出胎鼠大脑皮质,制备细胞悬液,进行原代细胞培养,第14 d建立缺氧/缺糖诱导的神经细胞凋亡模型。通过检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放量和一氧化氮(NO)的含量。同时用Hoechst 333342和PI双染色来观察细胞形态,用流式细胞仪进行凋亡细胞的计数,从而研究人参皂苷Rg1对神经细胞的保护作用及机制。结果神经细胞缺氧/缺糖后,LDH释放显著增加,NO的产生明显增加,神经细胞凋亡达到40.08%,与对照组相比有显著性差异(P<0.01),形态观察也发现大量神经细胞的染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,而人参皂苷Rg1及一氧化氮合酶(NOS)抑制剂—硝基-L-精氨酸(L-NAME)均能减少LDH的释放、抑制NO的过量产生,降低神经细胞凋亡的数目,与对照组相比有显著性差异(P<0.01),人参皂苷Rg1与L- NAME相比无明显差异(P>0.05)。另外,Rg1的作用随剂量增加而增加。结论NO的过量产生可以诱导神经细胞凋亡的产生,而人参皂苷Rg1具有拮抗凋亡的作用,其机制可能是通过抑制NOS的活性,减少NO的过量产生,减轻NO介导的神经毒性作用,从而减少神经细胞凋亡的数目,对神经细胞起到保护作用。
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