【摘 要】
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目的 研究痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质改变,探讨痹肿消汤治疗RA的作用机制. 方法 70只SD大鼠随机分为3组,采用牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实
【机 构】
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中南大学湘雅医院中西医结合研究所,长沙,410008
【出 处】
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第八届全国中西医结合实验医学研讨会
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目的 研究痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质改变,探讨痹肿消汤治疗RA的作用机制. 方法 70只SD大鼠随机分为3组,采用牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎(CIA)模型,应用双向凝胶电泳技术(two-dimensional gel electrophoresis,2DGE)分别分离正常组、CIA模型组及痹肿消汤组大鼠关节滑膜的总蛋白后,经胶体考染显色、图像分析、识别差异表达的蛋白质点,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质量指纹图谱(peptide mass fingerprint,PMF),然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点. 结果 建立了正常组、CIA模型组和痹肿消汤组关节滑膜的双向凝胶电泳图谱,其平均蛋白质点数分别为947±39,994±41,1031±52,其匹配率为92％,91％,94.2％;发现并鉴定了正常组、CIA模型组和痹肿消汤组大鼠滑膜的差异表达大于2倍的蛋白质点55个,这些差异表达蛋白质的功能涉及物质代谢、能量产生、物质转运、抗氧化应激、信号转导及细胞骨架蛋白,随即用免疫印迹的方法差异蛋白质annexin Ⅰ、aldolase A在正常组、CIA模型组、痹肿消汤组中的表达,其结果也显示了类似的表达差异. 结论 建立了正常组、CIA模型组、痹肿消汤组关节滑膜的双向凝胶电泳图谱,鉴定了55个与CIA病变相关的差异表达的滑膜蛋白质,为揭示CIA滑膜病变的机制及RA的发病机理提供了新的线索.annexin Ⅰ、aldolase A的免疫印迹验证结果与蛋白质分析结果的一致性表明,annexin Ⅰ、aldolase A可能与CIA的关节滑膜病变有关.痹肿消汤通过对CIA大鼠滑膜蛋白质表达的调控从而达到治疗目的.
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