【摘 要】
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目的：探讨热损(创)伤后角质形成细胞(KC)上清对真皮成纤维细胞(Fibroblast,Fb)生物学行为的影响。方法：建立KC热损伤模型,收集正常培养及热损伤后12h细胞培养上清,配制细胞条件培养液；分离培养人正常Fb,以50％浓度细胞条件培养液为效应浓度组,单纯DMEM组为对照.采用噻唑蓝法测定热损伤后KC培养上清对Fb增殖情况的影响；通过流式细胞仪,免疫荧光法、Real-Time PCR分别检
【机 构】
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Burn Center of PLA, Xijing Hospital, the Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, P.R.Chin
【出 处】
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第八届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术交流会
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目的：探讨热损(创)伤后角质形成细胞(KC)上清对真皮成纤维细胞(Fibroblast,Fb)生物学行为的影响。方法：建立KC热损伤模型,收集正常培养及热损伤后12h细胞培养上清,配制细胞条件培养液；分离培养人正常Fb,以50％浓度细胞条件培养液为效应浓度组,单纯DMEM组为对照.采用噻唑蓝法测定热损伤后KC培养上清对Fb增殖情况的影响；通过流式细胞仪,免疫荧光法、Real-Time PCR分别检测热损伤后KC培养上清对Fb凋亡及向肌成纤维细胞(MyoFibroblast,MFb)转分化的影响。结果：细胞增殖测定：热损伤上清条件培养液组12、24、36、48 h OD值(0.309±0.004,0.333±0.004,0.339±0.003,0.397±0.006)均高于同时间点DMEM组(0.232±0.002,0.258±0.006,0.268±0.005,0.289±0.005)差异均有统计学意义(P＜0.01),其中热损伤上清条件培养液组12、24 h OD值均高于同时间正常上清条件培养液组OD值(0.293±0.004,0.316±0.006)差异具有统计学意义(P＜0.05),36、48 h OD值低于同时间点正常上清条件培养液组OD值(0.343±0.005,0.415±0.006)48 h时间点差异具有统计学意义(P＜0.05)；凋亡测定中,热损伤上清组与DMEM组比较可明显抑制细胞凋亡(P＜0.01)、与正常上清组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05),免疫荧光、Real-Time PCR检测结果显示：热损伤上清组α-SMA的表达上调,提示热损伤上清组可刺激加快Fb向MFb转分化。结论：热损(创)伤后12hKC上清可明显促进Fb的增殖、抑制细胞凋亡发生、加快Fb向MFb转分化。
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