【摘 要】
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目的探讨人参皂苷Rb1(ginsenoside Rb1,GRb1)预处理对β-淀粉样蛋白(beta amyloidpeptide,Aβ)神经细胞毒性的影响及机制。方法取1d龄SD大鼠脑皮层神经细胞进行体外培养,6d后
【机 构】
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上海中医药大学基础医学院组织胚胎学教研室;
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目的探讨人参皂苷Rb1(ginsenoside Rb1,GRb1)预处理对β-淀粉样蛋白(beta amyloidpeptide,Aβ)神经细胞毒性的影响及机制。方法取1d龄SD大鼠脑皮层神经细胞进行体外培养,6d后分为阴性对照组、Aβ组、GRb1组、阳性对照组。GRb1组和阳性对照组分别加入终浓度为20μM的GRb1和维生素E,于37℃,5%CO2培养箱中预处理24h后换液,加入终浓度为40μM的Aβ25-35处理24h。Aβ组在神经细胞培养7d后加入终浓度为40μM的Aβ25-35处理24h。阴性对照组不给于任何处理。在倒置显微镜下观察各组细胞形态学改变并拍照;用4%多聚甲醛磷酸缓冲液固定细胞后使用4,6-二脒基-2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色,在荧光显微镜下观察细胞核改变并拍照;使用MTT法检测细胞活性;使用2,7-二氯荧光素(2,7-dichlorofluorescein,DCF)处理细胞,在荧光显微镜下观察细胞内活性氧簇变化并拍照;使用ATP检测试剂盒(碧云天生物技术研究所)在1450液闪仪(Perkin-Elmer公司,美国)中检测细胞内ATP含量;使用纯化细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒(上海杰美基因医药科技有限公司)在紫外分光光度计中检测细胞色素C氧化酶活性。
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