补骨脂抗菌蛋白PscAFP的酵母表达及转基因烟草抗病性分析

来源 :中国植物病理学会2010年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:littleboy88521
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以在中药材补骨脂中分离到的一个具有胰蛋白酶抑制剂活性抗菌抗菌蛋白PscAFP为研究对象。根据其N-端氨基酸序列设计简并引物,采用3RACE和YADE扩增获得Psc-AFP对应编码序列,命名为PscAFP:然后将其在毕赤酵母中表达,并测定了重组PscAFP的抗菌活性;同时构建其植物表达载体,将其在烟草中表达。结果表明:重组PscAFP对烟草赤星病菌抱子萌发有明显的抑制作用,以Phe-Val-Arg·pNA、Boc-Gly-Pro-pNA、BNPNA、BANA为底物,利用胰蛋白酶水解底物实验发现,重组PscAFP对胰蛋白酶活性有明显的抑制作用;通过根癌农杆菌介导对烟草外植体进行遗传转化并获得了转基因再生植株,转基因烟草接种赤星病菌实验表明,转PscAFP烟草对烟草赤星病抗性有显著的提高。
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