【摘 要】
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以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和Not L/BamH 1双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了
【机 构】
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成都军区联勤部军事医学研究所 成都 650032
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以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和Not L/BamH 1双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了真核重组表达质粒pIRESVP1,并进行了序列测定。6只9月龄犬分别接种不同剂量的pIRESVP1或空质粒及生理盐水,8周接种一次,每次接种前采血,测定血清的血凝抑制效价,第二次免疫后即可检测到较高的血清效价。在第三次接种4周后,对全部实验犬进行攻毒,攻毒后第7d及14d时采血,测定血清的血凝抑制效价。所有接种plRESVP1疫苗的犬均能抵抗CPV强毒的攻击,而接种空质粒和生理盐水的对照犬则全部发病。本研究证明了所构建的核酸疫苗(pIRESVP1)能使犬免受犬细小病毒强毒的感染。
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