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应用聚合酶链反应PCR方法,从患病石斑鱼分离到的哈维氏弧菌基因组中扩增获得一个约800bp的外膜蛋白基因,将其克隆到pGEM-T Easy载体,序列分析表明:该基因含有一个801bp的开放读码框ORF,编码266个氨基酸,推算分子量为28.112 kDa。用PCR方法对此基因进行改造后,定向克隆至原核表达载体pBV220,构建重组哈维氏弧菌外膜蛋白OmpK基因表达载体pBVOmpK,并在大肠杆菌中获得高效表达,表达目的蛋白占细菌总蛋白的24.8%。蛋白经纯化后,免疫新西兰大白兔制备抗血清,经Westem-blotting分析表明,重组蛋白与从哈维氏弧菌中提取的外膜蛋白具有相同的免疫原性。