【摘 要】
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目的:设计针对HBVC基因启动子区的siRNA,观察其对HBVDNA复制的抑制作用.方法:根据siRNA的设计原则,针对HBVDNAC基因启动子区设计两条引物,常规退火,磷酸化,与酶切后质粒PmU6连接,构建能产生发夹样小干扰RNA的质粒C2/siRNA、C4/siRNA,而P1/siRNA为我们以往构建的针对HBVDNA多聚酶区的质粒,通过转染HepG22.2.15细胞研究其对HBVDNA复制水
【机 构】
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第三军医大学西南医院全军感染研究所,400038
【出 处】
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第五届全国肝脏病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议
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目的:设计针对HBVC基因启动子区的siRNA,观察其对HBVDNA复制的抑制作用.方法:根据siRNA的设计原则,针对HBVDNAC基因启动子区设计两条引物,常规退火,磷酸化,与酶切后质粒PmU6连接,构建能产生发夹样小干扰RNA的质粒C2/siRNA、C4/siRNA,而P1/siRNA为我们以往构建的针对HBVDNA多聚酶区的质粒,通过转染HepG22.2.15细胞研究其对HBVDNA复制水平的影响.结果:转染C2、C4、P1质粒后HBVDNA均有不同程度降低.其中C4-2效果最好,几乎100％抑制HBVDNA复制,而C2-4、C4-3、P1分别降低了72.5％、51.2％、90.4％;C2-4、C4-2、P1转染后HepG22.2.15细胞中未能测到HBVcccDNA,C4-3转染后HBVcccDNA降低了50％.结论:针对C基因启动子区的干扰RNA可以抑制HBVDNA及HBVcccDNA复制.
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