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目的：分析桃红四物汤对体外培养的骨髓间充质干细胞增殖，成骨分化的影响.方法：采用5倍等效剂量桃红四物汤灌服大鼠，制备含药血清，以灌服等体积生理盐水制得对照血清；采用贴壁筛选法培养大鼠骨髓间充质干细胞，同时进行细胞表型鉴定，并以含药血清干预第三代rBMSCs.MTT法检测细胞增殖情况；于干预后的第3d、6d、9d和12d分别测定细胞碱性磷酸酶(ALP)活性、干预后6d、11d、16d分别测定骨钙素(BGP)、Ⅰ型胶原、钙盐沉积量及钙化结节敷，并比较两组间差异.结果：桃红四物汤含药血清明显促进外源性骨髓同充质干细胞增殖及促进骨髓间充质干细胞成骨性分化，表现在该组的碱性磷酸酶活性、骨钙素、Ⅰ型胶原、钙盐沉积量和钙化结节数高于对照组(P＜0.05).结论：桃红四物汤含药血清具有促进rBMSCs增殖和成骨性分化活性的作用.