祛邪胶囊对晚期肠癌的机制研究

来源 :中国老年学学会老年肿瘤专业委员会(CGOS)2014年年会暨第八届中国老年肿瘤学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhengziwei5
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  目的:祛邪胶囊是我科从古方中化裁而来的制剂,临床应用十余年,前期的研究中发现祛邪胶囊可减少晚期肠癌病死率,延长生存期、中位生存期,提高生存质量,可以减少Ⅱ~Ⅲ期结肠直肠癌的复发转移[1-8].但是对于其作用的分子机制研究空白,本研究立足于前期的临床研究结果,探讨祛邪胶囊对于晚期肠癌的可能作用机制.方法:本研究利用细胞培养技术,APA、MTS法检测祛邪胶囊含药血清对肠癌HCT-116及另外几种组织来源的肿瘤细胞增殖抑制率,检测祛邪胶囊评价祛邪胶囊拆方和与四君子汤合方对肠癌细胞HCT-116细胞的增殖抑制率;流式细胞技术检测Anexin V-FITC+/IP双染法检测祛邪胶囊与四君子汤以及合方的早期凋亡率与中晚期凋亡率;Western bloting检测凋亡与自噬的相关蛋白caspase-3和LC3的改变;利用CT-26荷瘤Balb/c小鼠模型评价祛邪胶囊拆方及与四君子汤合方的生存期、抑瘤率、体重、瘤重、以及抗肿瘤相关细胞因子INF-γ、IL-4,以及观察Th1/Th2平衡的变化.结果:本研究通过含药血清实验发现祛邪胶囊可以在体外抑制人肠癌HCT-116细胞增殖对健康人PBMC抑制率较低,并具有对肠癌的抑制的组织特异性.与祛邪胶囊全方组相比,祛邪胶囊去关键有毒成分组后体外细胞抑制作用降低.祛邪胶囊其作用机制可能与caspase通路介导的凋亡机制相关.但是这种体外细胞抑制作用在四君子汤共同服用下却被拮抗,可能与凋亡自噬的拮抗作用相关.通过体内急毒实验证明祛邪胶囊最大给药量为20g/kg.通过建立肠癌CT-26细胞种植babl/c小鼠模型,本研究发现祛邪胶囊组肿瘤与对照组相比体积减小,但小鼠生存率下降,体重下降,th1/th2下降,祛邪胶囊去关键有毒成分组生存率高于祛邪胶囊组但Th1/Th2下降.四君子汤+祛邪胶囊组小鼠生存率与对照组相比无差别,体重增加,小鼠Th1/Th2升高,祛邪胶囊与四君子汤交替服用组小鼠与对照组比生存率增高,体重增加,小鼠Th1/Th2升高.结论:本研究发现祛邪胶囊在体外凋亡通路诱导肿瘤细胞死亡,发现去掉关键有毒成分后的抑制作用减弱,提出祛邪胶囊与扶正类药物合用可能出现拮抗作用而影响其抗肿瘤机制.同时发现祛邪胶囊与扶正类代表方剂四君子汤合用可以在体外调节T辅助细胞功能,但可能影响其体外抗癌作用,而祛邪胶囊单用会导致荷瘤小鼠生存期较短,体重下降,而祛邪胶囊与四君子汤合用则避免了这个问题,相比与四君子汤合方服用,祛邪胶囊与四君子汤交替服用取得了更好的生存率和抑瘤率.提出了基于整体观(祛邪/健脾),抗肿瘤细胞毒(凋亡/自噬),T免疫平衡(Th1/Th2)的中医平衡治疗观.
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