甲基强地松龙对肾上腺素所致的大鼠神经源性肺水肿肺组织中AQP5表达的影响

来源 :中华医学会第十八次全国儿科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Ling_Hun
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目的:观察过量肾上腺素诱导的神经源性肺水肿(NPE)大鼠肺组织病理变化和AQP5的表达,以及不同MP对水通道蛋白(AQP5)表达的影响,为手足口病的临床应用提供理论依据.方法:Wister大鼠随机分为对照组(n=10),NPE组(n=10),MP10mg/kg组(A组)、20mg/kg组(B组)、30mg/kg组(C组),NPE组大鼠按2.7mg/kg腹腔注射肾上腺素注射液(1mg:1m)。MP治疗组是在NPE模型鼠再加MP干预。观察指标为肺中叶湿/干重比值(W/D);HE染色观察肺组织病理学改变;免疫组化染色观察肺组织AQP5表达;实时定量PCR方法检测AQPSmRNA表达;Western blot检测AQP5表达。结果:①大鼠一般情况观察:NPE组大鼠较正常组呼吸明显加快、躁动,大鼠双肺底可闻及湿罗音。各不同剂量MP治疗组大鼠呼吸无明显加快、躁动,主要表现为活动减少,存活时间延长。②肺组织形态及病理观察:NPE组发现双肺体积增大,水肿明显,色泽较暗,可见点片状淤血、表面分布大片状暗红色出血灶,切面有白色或淡红色泡沫样液体溢出。气管内亦充满泡沫样液体。而MP各治疗组较NPE组双肺体积减小,水肿减轻。肺表面散在点状或小片状暗红色出血灶,且随着CP治疗量的增加,肺组织出血、水肿明显减轻。⑧肺W/D重比值:NPE组W/D与对照组相比明显升高(P<0.05),各MP治疗组W/D比NPE组明显降低(P<0.05),三组相比,MP30mg/kg治疗组最低(P<0.05)。④肺组织AQP5免疫组化染色:对照组肺组织中AQP5在肺泡I型上皮细胞的腔顶面有广泛而强烈的表达。NPE组QP5蛋白表达较对照组减少,染色变浅,AQP5表达明显减弱(P<0.05);MP各治疗组较NPE组AQPS表达显著加强(P<0.05);治疗的三组相比,C组AQP5密度最高,有统计学意义(P<0.05)。⑤AQP5 mRNA表达水平:在287bp处可见AQP5 mRNA表达,NPE组与对照组相比,AQP5表达明显减弱(P<0.05);MP各治疗组较NPE组AQP5表达显著加强(P<0.05);A组、B组、C组三组相比,C组AQP5表达最高,有统计学意义(P<0.05)AQP5 Western blot:NPE组肺组织AQP5表达与对照组相比明显减少(P<0.05);MP各治疗组表达较NPE组明显增强(P<0.05);A组、B组、C组中C组表达明显增强,有统计学意义(P<0.05).结论:①给予腹腔注射肾上腺素注射液(1mg:1ml),能制备典型大鼠NPE模型。②肾上腺素诱导的N尸E大鼠肺组织AQP5表达较对照组显著降低,CP治疗后可使N尸E大鼠肺湿/干比值(W/D)降低,AQP5表达上升,肺水肿减轻,随着甲强龙剂量的增加,而AQP5表达增加显著。
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