多重PCR技术检测沙门菌两种四环素耐药基因

• 作 者: 孔繁德[1]陆承平[2]彭海滨[3]徐淑菲[2]陈琼[4]
• 机 构: 厦门出入境检验检疫局 厦门361012
• 出 处: 第二届全国人畜共患病学术研讨会
• 发表日期: 2008年期

本研究应用二对特异性引物同时检测四环素耐药基因TetB和TetC。通过对35株沙门氏菌分离株的四环素耐药性检测，表明所有沙门氏菌分离株均含retC基因，与药敏试验结果阳性符合率65.7％(23/35)，8株含有TetB基因，与药敏试验结果阳性符合率100％，TetB基因和TetC基因双阳性的菌株与药敏试验结果阳性符合率也为100％。选取其中部分菌株扩增出的TetB和TetC基因片段进行序列分析，5株菌的TetB基因扩增产物序列完全相同，与质粒pRT11相应序列同源性高达99.7％；14株菌的TetC基因扩增产物与质粒pBR322中的相应序列同源性为100％。证实沙门氏菌耐药基因普遍存在，且同时含有TetB和TetC基因的菌株表现耐药。多重PCR技术同时检测两种四环素耐药基因，适合于大量样本的检测，对开展沙门氏菌四环素多种耐药基因的分子流行病学监测提供了有效的途径。