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目的:在大鼠腹腔注射脂多糖(LPS)引起学习与记忆能力损伤的模型上,进一步探索损伤后海马组织microRNA的差异表达及靶基因预测.
材料和方法:大鼠腹腔给予LPS(2mg/kg)制备学习与记忆能力损伤模型.取对照以及给药4天后样本进行microRNA微阵列分析.采用Real-time RT-PCR进一步对差异表达microRNA进行验证.同时检索microRNA数据库以及相关文献分析,寻找潜在的靶基因.
结果:LPS致炎后第4天与正常组相比，筛选出3个差异表达倍率在1.5倍以上、P值小于0.05的miRNAs。其中rno-miR-21上调2.36倍，rno-miR-146a上调5.28倍，而rno-miR-375下调0.019。实时定量荧光RT-PCR对于目标RNA具有较强的定量能力，可以准确检测其表达情况，排除由微阵列芯片法引入的假阳性结果。通过Real-time RT-PCR对筛选出的3个差异表达的miRNAs进一步验证，结果显示rno-miR-21呈上调(2.29倍)，rno-miR-146a呈上调(2.31倍)、rno-miR-375呈下调(0.16倍)，与微阵列分析变化趋势一致，且仍保持偏差倍率超过2倍以上(P<0.05 )。提示所筛选出的3个miRNAs在LPS致炎模型中均可能参与并调控海马组织相关病理情况。文献调研发现，肿瘤坏死因子TNF可能与miR-21有密切联系。
结论:LPS导致大鼠海马miR-21,miR-375,miR-146a差异表达，提示miRNAs可能参与调控相关病理事件。