论文部分内容阅读
目的：初步研究胰岛素对HepG2细胞GPI-PLD基因表达和GPI-PLD酶活性的影响，以及对细胞膜上GPI锚定蛋白质如CEA分子的释放改变，这些效应是否能够提高HepG2细胞和GPI-PLD基因转染HepG2细胞对淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)的敏感性。方法：用阳离子聚合物将本室已经构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)/GPI-PLD转入HepG2细胞，G418筛选出阳性细胞克隆。RT-PCR法鉴定GPI-PLD基因的mRNA表达水平，定量检测GPI-PLD酶活性。利用胰岛素分别诱导HepG2细胞以及稳定转染GPI-PLD基因的HepG2细胞48h，检测各组细胞GPI-PLD基因的表达水平和GPI-PLD酶活性；ELISA检测各组细胞CEA的释放情况；流式细胞术检测细胞表面GPI锚定的CEA分子的变化。结论：胰岛素能够诱导HepG2细胞GPI-PLD基因过表达，GPI-PLD活性增加。同时，细胞膜上GPI锚定的CEA减少，从而增加LAK细胞杀伤HepG2细胞的敏感性。