【摘 要】
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目的:研究生长因子TGF-β1、Activin A及TGF-β/Activin信号通路特异性受体抑制剂SB431542单独以及联合应用对牙髓细胞表达Nanog的影响,探讨TGF-β/Activin信号通路对Nano
【机 构】
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510055广州,中山大学光华口腔医学院·附属口腔医院,广东省口腔医学重点实验室
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目的:研究生长因子TGF-β1、Activin A及TGF-β/Activin信号通路特异性受体抑制剂SB431542单独以及联合应用对牙髓细胞表达Nanog的影响,探讨TGF-β/Activin信号通路对Nanog的调控作用.方法:采用不同浓度的TGF-β1、Activin A和SB431542刺激第3~5代人牙髓细胞,检测刺激因子浓度对Nanog表达的影响;将TGF-β1、Activin A刺激细胞0、3、6、12、24、48、72h,检测不同时间Nanog表达的变化量;选取合适浓度的TGF-β1、Activin A和SB431542分别及联合处理牙髓细胞,再以SB431542处理过表达Nanog的牙髓细胞,Real-time qPCR检测Nanog mRNA水平的变化,Western blotting检测Nanog蛋白的变化.结果:TGF-β1和Activin A均可促进Nanog的表达,SB431542则抑制Nanog的表达.20 ng/ml的TGF-β1处理48h时Nanog mRNA和蛋白水平明显升高,10 ng/ml的Activin A处理48h时Nanog mRNA和蛋白水平最高,SB431542的浓度为20μM时对牙髓细胞Nanog的抑制作用明显.SB431542能降低TGF-β/Activin信号通路及过表达Nanog牙髓细胞所致的Nanog表达升高.结论:TGF-β1和Activin A促进而SB431542抑制Nanog的表达,提示牙髓细胞中TGF-β/Activin信号通路正性调节Nanog的表达.
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