论文部分内容阅读
目的:使用高致病性PRRSV(HP-PRRSV)毒株HuN4和它的减毒弱毒苗HuN4-F112,阐述外周血单核细胞(PBMCs)的病毒嗜性改变和早期细胞因子产生与对仔猪致病力的相关性。方法:5头仔猪接种HuN4-F112,另外5头仔猪灌输DMEM。免疫28天后,所有仔猪使用HuN4进行攻毒。收集血样用于检测病毒含量和细胞因子的产生。使用两重萤光免疫染色检测法和流式细胞计量术,使用不同细胞表面分子的单克隆抗体来确定PRRSV感染的单核细胞的表型。PRRSV N蛋白单克隆抗体和Alexa Fluo 488山羊鼠抗IgG用于检测PRRSV受感染细胞的抗原族。血清病毒负载使用定量TaqMan rt-Pcr检测。血清中细胞因子水平使用商业ELISA试剂盒测定。使用单因子变异数分析法的LSD和Dunnett检测来评估组间差异。结果:与对照组比较攻毒前接种过疫苗的仔猪,其血清样本中检出的病毒负载更低。HPPRRSV毒株HuN4诱导感染仔猪更早产生和更高水平的炎症细胞因子。在最初的DPI7、CD3、CD4和CD8 T淋巴细胞有更高的阳性率;而B淋巴细胞和单核细胞仅在免疫仔猪中存在而不是所有攻毒猪。所有攻毒仔猪中炎性细胞亚群的量远高于其它仔猪,并在DPIS达到高峰。免疫仔猪和免疫+攻毒仔猪炎性细胞亚群在所有检查的时间点都很少。结论:对外周血单核细胞病毒嗜性的改变和影响宿主细胞因子产生,可能与HP-PRRSV对仔猪致病力相关。