【摘 要】
：
目的 了解体内外两种方法检测乙肝DNA疫苗诱生BALB/c小鼠特异性CTL活性的特点,比较其异同,建立与体外法互为补充、且更加直观、简便的活体CTL活性检测模型.方法 用HBV-S真核表达质粒pVAX1/S对SP2/0细胞进行转染,经鉴定后作为目的靶细胞(稳定转染并表达HBV主蛋白,命名为SP2/0-S细胞);对照靶细胞为稳定转染pVAX1空载质粒的细胞(命名为SP2/0-P细胞)备用.活体诱生实
【机 构】
：
深圳市东湖医院,广东深圳,518020 成都军区总医院
【出 处】
：
第一次全国中西医结合传染病学术会议
论文部分内容阅读
目的 了解体内外两种方法检测乙肝DNA疫苗诱生BALB/c小鼠特异性CTL活性的特点,比较其异同,建立与体外法互为补充、且更加直观、简便的活体CTL活性检测模型.方法 用HBV-S真核表达质粒pVAX1/S对SP2/0细胞进行转染,经鉴定后作为目的靶细胞(稳定转染并表达HBV主蛋白,命名为SP2/0-S细胞);对照靶细胞为稳定转染pVAX1空载质粒的细胞(命名为SP2/0-P细胞)备用.活体诱生实验:用目的或对照靶细胞分别使小鼠荷瘤,观察免疫及非免疫小鼠在各靶细胞负荷下的生存时间与肿瘤的生长情况,设置不同组合做同期对照观察,小鼠生存率的差异可以提示体内特异性CTL是否存在.体外诱生实验:采用经典CTL活性检测方法,LDH释放法成品药盒.SP2/0-S细胞与SP2/0-P细胞作为靶细胞,免疫鼠与非免疫鼠的脾细胞为效应细胞,按照不同效/靶比共孵育后以酶标仪检测LDH的释放活性.结果 活体诱生实验:免疫小鼠存活时间明显长于对照小鼠(P＜0.05).体外诱生实验:免疫鼠CTL活性在效/靶比为50/1时出现最大杀伤活性,为36.9％,明显优于对照组(P＜0.05).结论 体内外两种方法均能够检测到乙肝DNA疫苗诱生BALB/c小鼠特异性CTL活性,实验中发现体外LDH释放法CTL活性并不高,但是总体上仍能够反映CTL活性.而活体诱生实验操作相对简便,表现更为直观,可望成为与经典方法相互补充的新型实验模型.
其他文献
肝纤维化是慢性肝病的共同病理特征,现代医学认为其发病机制是:反复肝细胞的炎症刺激,导致肝星状细胞的活化增殖,细胞因子的异常表达,胶原等细胞外基质的异常合成增加而降解减少,造成细胞外基质在肝脏过度沉积,最终形成肝纤维化,其进一步发展的结局为肝硬化.本文对中西医结合抗肝化纤维化作用机制的研究进展进行了探讨。
细胞因子在HBV感染所致慢性肝损害中的作用一直备受关注.近年来,细胞因子的研究有了进一步的深入,在基础领域和应用领域有了新的发展,它不仅能帮助闸明乙肝的发病机制,更为我们开发确切有效的药物打下了良好的基础.本文就目前细胞因子的一些研究概况进行了综述。
本文对刮痧疗法对急性病毒性肝炎降酶作用进行了观察，对其研究对象和方法进行了介绍，分析了研究结果，最后对其治疗过程进行了探讨。
麻疹是一种由麻疹病毒引起的急性呼吸道传染病,主要发生在儿童,而近年来麻疹发病年龄有增高趋势。2005年上海市浦东新区传染病医院2月～9月收治142例根据文献确诊的麻疹患者中成人占118例,发病率占83％;儿童患者24例,占17％,其中本地儿童9例.本文对该医院2005年2月～9月收治的麻疹患者的临床特征和诊疗情况进行了分析.
在我国,获得性免疫缺陷综合症(AIDS,艾滋)的流行目前呈高速发展趋势,由于缺乏特效治疗药物,临床检测诊断仍是控制HIV传播和控制艾滋病流行的重要手段.HIV检测十分严格,任何误诊,包括漏检和假阳性都可能导致严重的后果.检测手段上,艾滋病主要依靠血清学检测,方法分为初筛和确证两类.初筛是艾滋检测的第一步,强调高度敏感性,要求能检出所有阳性样本而不漏检,因此初筛试验方法及试剂质量尤为重要.夹心ELI
目的 探索用蛋白芯片检测慢性肝病患者血清细胞因子的可能性.方法 制备了检测IL-2、IL-4和TNF-α细胞因子的蛋白芯片,并优化了检测条件.对34份临床标本进行检测,并与ELISA检测进行了比较.结果 蛋白芯片检测结果与ELISA结果有很好的相关性,但蛋白芯片具有更好的灵敏度.结论 用蛋白芯片检测慢性肝病血清标志物是完全可能的.
目的 研究茵栀清肝汤对四氯化碳诱导急性肝损伤大鼠的细胞因子IL-19、IL-18、IL-16和IL-10影响,以及该方对急性肝损伤的保护作用.方法 Wistar大鼠随机分为正常组、急性肝损伤模型组、中药治疗低、中、高剂量组,中药组分别予以茵栀清肝汤3g/kg、6g/kg、12g/kg每日1次灌胃,共7日.末次灌胃后除正常组外,其余所有大鼠予以50％四氯化碳5mL/kg灌胃1次,24小时后处死全部大
本研究从深圳市两名耐拉夫米定治疗的慢性乙型肝炎病人血清中提取HBV DNA,采用PCR方法在HBV负链开环缺口处及基因组中单一酶切点(Spe Ⅰ)处设计两对引物从两个方向分别扩增1.15kb和2.05kb的单链及双链DNA区,利用基因重组技术,将两片段经酶切及连接后克隆至质粒pCDNA3.1中获得HBV3.2Kb的全基因.经错配PCR(mismatched polymerase chain rea
拉夫米定为核酸类似物,该药物治疗乙肝时主要作用于HBV DNA多聚酶,抑制DNA复制,迅速降低血清中HBV DNA水平.但在长期拉夫米定治疗中,部分患者出现耐药性,造成疾病反弹.拉夫米定耐药多由HBV多聚酶基因YMDD变异引起,即酪氨酸、蛋氨酸、天门氡氨酸、天门氡氨酸区域,552位蛋氨酸(M)分别由缬氨酸(Ⅴ)或异亮氨酸(Ⅰ)替代,YMDD发生变异时部分患者出现ALT升高,病情呈急性发作,出现乙肝
本研究将表达乙肝表面抗原S2S的核酸疫苗接种BALB/c小鼠,观察接种部位的抗原表达、不同时期的特异性抗体、体外CTL活性;并将以pcDNA3.1mychis为载体的乙肝核酸疫苗接种C57BL/6乙肝转基因小鼠,检测外周血特异性抗体的产生和HBV DNA水平、观察肝组织中乙肝病毒抗原表达的情况,研究该疫苗对慢性乙肝病毒感染可能具备的防治效应.