【摘 要】
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目的 应用体外培养的正常人淋巴母细胞AHH-1和皮肤成纤维细胞HSF研究香兰素衍生物丁香醛(VND3207)对60Co γ射线诱发DNA损伤和细胞凋亡等的防护作用,旨在发现新的抗辐射活性化合物.方法 采用体外细胞培养,将细胞用不同浓度的VND3207化合物在照射前2h预处理后接受不同剂量60Co γ射线照射.采用中性单细胞凝胶电泳实验及γ-H2AX免疫荧光原位杂交检测DNA双链断裂损伤修复；通过A
【机 构】
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南华大学公共卫生学院,湖南省衡阳市,421001;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京 100850
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目的 应用体外培养的正常人淋巴母细胞AHH-1和皮肤成纤维细胞HSF研究香兰素衍生物丁香醛(VND3207)对60Co γ射线诱发DNA损伤和细胞凋亡等的防护作用,旨在发现新的抗辐射活性化合物.方法 采用体外细胞培养,将细胞用不同浓度的VND3207化合物在照射前2h预处理后接受不同剂量60Co γ射线照射.采用中性单细胞凝胶电泳实验及γ-H2AX免疫荧光原位杂交检测DNA双链断裂损伤修复；通过Annexin Ⅴ标记结合流式细胞术和双荧光染色法观察细胞凋亡；流式细胞术测定细胞周期变化；运用克隆形成实验分析细胞放射敏感性；6-TG抗性突变细胞克隆形成实验分析HPRT基因突变；胞质分裂阻滞细胞微核实验检测细胞礅核形成率.结果：细胞克隆形成实验表明5 ～ 40μM浓度VND3207能增强细胞的辐射抗性,随着VND3207浓度增加,照射细胞的克隆形成率增高.AnnexinⅤ标记结合流式细胞术和双荧光染色法检测均显示,4.0Gyγ射线照射AHH-1细胞后凋亡发生率,随着时间延长而增加,40μM VND3207能显著降低4.0 Gyγ射线照射诱发的凋亡率及坏死率.通过流式细胞术测定细胞周期变化,发现VND3207对辐射细胞周期进程的改变没有明显的影响.60Coγ射线照射诱发细胞DNA双链断裂损伤呈照射剂量-效应关系,加入VND3207化合物对60Co γ射线照射诱发DNA双链断裂损伤具有良好的保护作用,且5μM浓度就能观察到防护DNA双链断裂损伤的效应.同时,VND3207在5 ～40μM浓度下,能显著降低0.5 Gy、1.0 Gy和2.0 Gyγ射线照射AHH-1细胞的微核率,且呈现良好的剂量-效应关系,其中,40μM浓度作用下2.0 Gyγ射线照射细胞的微核率减少40％.\ND3207亦能降低由60Co γ射线照射诱发的细胞HPRT基因突变率.结论：在体外培养细胞体系中,VND3207能通过减少辐射细胞DNA双链断裂损伤发挥辐射防护和维持基因组稳定性作用.
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