Bt新分离菌株条虫晶体蛋白基因的鉴定与克隆

来源 :第七届全国杀虫微生物学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:abcdefghijklmn
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
苏云金芽孢杆菌是一种昆虫病原菌,它对昆虫的毒性主要依靠在芽孢形成期产生的具有杀虫专一性的各种杀虫晶体蛋白(InsectcidaI CrystaI Proteins,ICP3),编码ICP3的基因称cry基因,该研究首先用cryI,cryⅢ和cryⅤ基因的专一性引物对从土壤中分离到的56株苏云金芽孢杆菌菌株的基因类型进行PCR检测,其中2株含CryⅢ基因,7株含cryI基因,21株含cryⅤ与CryI基因。以HD-1的cryⅤ基因N端726bp特异性PCR产物为模板制备探针,进行Southern杂交分析,探明了21株含cryⅤ型基因的菌株其cryⅤ基因定位于150MDa左右的大质粒上,用PCR方法扩增对鞘翅目与鳞翅目昆虫皆有杀虫活性的S<,101>株的cryⅤ-z基因,克隆到BluescriptM 13(一)载体上,序列测定结果表明所得2157 bp序列与Tai1or等人(1992)报道的cryⅤ基因有6个核苷酸的差异,从而导致所编码的蛋白4个氨基酸的变异,故认为是一个新的cryⅤ基因。以pBV220为表达载体,在大肠杆菌中表达cryⅤ基因,表达产物进行SDS-pAGE分析,在81×10<3>的位置上有一条较浓的蛋白带,用外源表达的cryⅤ蛋白对银纹夜蛾(Plusia agnataStaudinger)进行杀虫活性测定,无明显毒性。
其他文献
将含辅助蛋白基因p20穿梭质粒pBMB20-2电转化到对鳞翅目有特异毒力的野生型苏云芽孢杆菌YBT-803-1中,得到含p20蛋白的工程菌BMB20-4,该菌株发酵液的蛋白质含量YBT-803-1高1倍左
综述了应用离体培养的昆虫细胞研究苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis的毒力和活性谱,苏云金杆菌的作用机制和抗性等方面的进展。
从HP-IB演变而来并成为正式 IEEE-488标准的GPIB(通用接 口总线)仪器控制标准问世20年来,仍然被广泛应用于当今的测试和测量系统中。GPIB之所以能继续受到人们的欢迎,这可归
本研究对番茄成熟突变体rin、nor、alc材料与正常成熟番茄品种及其杂种一代果实,在绿熟期采收后果实的呼吸强度、乙烯释放量及多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性进行了测定和分析。结
<正> 1992年对于中央电视台新闻中心来说,是紧张而又硕果累累的一年。日前,本刊记者就92年电视新闻的总体情况和93年电视新闻的发展趋势,采访了中央电视台新闻中心主任章壮沂(下简称
在详细研究了苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis简称Bt)自发形成原生质体特性的基础上,不使用溶菌酶,可使原生质体形成率达75℅~99℅,再生率达12℅~35℅。发现了正常菌体在高渗
新分离的4株对夜蛾科害虫高毒力的苏云金杆菌菌株分属于H和H型,实验证明1014和113菌株对棉铃虫幼虫的毒力分别是HD-1的4.26和2.98倍;9454,113和9165菌株对斜纹夜蛾的毒力分别是HD