【摘 要】
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目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对体外培养的小鼠骨骼肌细胞的致凋亡作用.方法:以小鼠骨骼肌C2C12细胞为研究对象,不同浓度的(10、20、40ng/ml)TNF-α作用6、24、48小时
【机 构】
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解放军总医院第一附属医院 全军烧伤研究所 解放军总医院烧伤整形医院 国家重点学科 北京 100048
【出 处】
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中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会
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目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对体外培养的小鼠骨骼肌细胞的致凋亡作用.方法:以小鼠骨骼肌C2C12细胞为研究对象,不同浓度的(10、20、40ng/ml)TNF-α作用6、24、48小时后,通过原位细胞凋亡和坏死染色(Hoechest33258、PI染色)检测细胞凋亡坏死率,琼脂糖梯度电泳检测凋亡DNA片断.选择20ng/mlTNF-α作用48小时的细胞,透射电镜观察细胞微观形态,Western Blot检测肿瘤坏死因子TNF-α对凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白表达的影响.结果:Hoechst 33258、PI染色显示,经不同浓度的TNF-α作用后,随TNF-α作用时间延长和浓度增大凋亡坏死细胞数目增加.20ng/mlTNF-α作用48小时后,细胞内片段化DNA琼脂糖凝胶电泳后出现了典型的凋亡DNA梯形条带;电镜观察发现部分细胞出现典型的细胞凋亡形态改变;并且TNF-α能够上调促细胞凋亡基因Bax,下调抑制凋亡基因Bcl-2的蛋白表达.
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