论文部分内容阅读
目的 观察血管性痴呆小鼠海马组织线粒体融合蛋白1(mitofusin 1,Mfn1)、线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,Mfn2)和线粒体分裂蛋白1(mitochondrial fission protein 1,Fis1)蛋白表达和mRNA水平的动态变化,并观察左旋丁基苯酞(l-3-n-butylphathlide,l-NBP)对线粒体动力学变化的干预作用.方法 75只健康雄性C57Bl/6小鼠随机分为5组：假手术对照组、VD模型组、预防给药组(l-NBP 30 mg/kg,术前连续7d)、低剂量治疗组(1-NBP 30 mg/kg,术后连续28 d)和高剂量治疗组(1-NBP 60 mg/kg,术后连续28 d).利用Morris水迷宫对各组小鼠进行学习、记忆能力测试,HE染色观察海马组织病理学变化,Western-blot及实时荧光定量反转录PCR检测海马组织Mfn1、Mfn2和Fis1蛋白表达及mRNA水平的变化.结果 (1)Morris水迷宫：定位航行实验测试小鼠学习成绩,与假手术组相比,VD组寻台潜伏期明显延长(P＜0.05)；与VD组相比,预防组和高剂量治疗组寻台潜伏期明显缩短(P＜0.05),而低剂量治疗组缩短不明显.空间探索实验测试小鼠记忆成绩,与假手术组相比,模型组平台象限滞留时间百分比明显减少(P＜0.05)；与模型组相比,预防组和高剂量治疗组滞留时间百分比明显延长(P＜0.05),低剂量治疗组滞留时间无明显延长.(2)HE染色：除假手术组以外,其余各组小鼠海马CA1区均可见片段性锥体细胞缺失,以VD模型组最为显著,低剂量治疗组次之,预防组和高剂量治疗组锥体细胞排列较为整齐,核固缩现象较少.(3)海马组织Mfn1/2、Fis1蛋白表达及mRNA水平的变化：与假手术组相比,模型组Mfn1/2蛋白表达及mRNA水平增高(P＜0.05),Fis1蛋白表达及mRNA水平减少(P＜0.05)；与模型组相比,预防组和高剂量治疗组Mfn1/2蛋白表达及mRNA水平均降低(P＜0.05),Fis1蛋白表达及mRNA水平均增高(P＜0.05),低剂量治疗组Mfn1/2蛋白表达及mRNA水平仍较高,Fis1蛋白及mRNA水平仍处于低表达水平.结论 反复脑缺血再灌注能打破海马神经元原有的线粒体动力学的平衡态,而线粒体动力学机制的失衡可能与海马神经元的损伤密切相关；在l-NBP干预作用下,小鼠的空间学习记忆功能和线粒体动力学失衡可在一定程度上得以改善,提示其神经保护作用可能与调控线粒体平衡有关.