毒死蜱致胚胎侧脑室壁发育异常的顶底极性差异

• 作 者: 王大炜 郑建辉 陈晓萍
• 机 构: 浙江工业大学生物与环境工程学院,杭州,310014
• 出 处: 浙江省毒理学会第一届学术年会暨食品药品与人类健康论坛
• 发表日期: 2014年5期
• 关键词: 毒死蜱 胚胎侧脑室壁 发育异常现象 顶底极性差异 神经毒性

目的:低浓度毒死蜱能干扰胚胎早期神经发育,侧脑室在发育过程中的顶底极性主要体现在增殖层及分化层的分层结构.在神经发生早期,侧脑室壁仅由VZ、PP两层细胞构成,到神经发育高峰期,侧脑室壁扩展为由VZ、SVZ、IZ、CP四层细胞构成.其中VZ和SVZ层为顶端增殖层,主要包括顶端前体细胞(APs)和中间前体细胞(BPs);PP、IZ、CP层为基底端分化层,主要细胞为神经元.本研究通过分析低浓度毒死蜱作用后侧脑室各分层细胞的增殖分化状况,探讨毒死蜱对侧脑室发育影响的顶底极性差异.
方法:在胚胎(Embryos)7.5-11.5天，给孕鼠皮下注射5mg/kg/d毒死蜱，分别制备E12,14,16天定时胚胎。经4％多聚甲醛固定、石蜡包埋，制备4um厚的胚胎脑水平位连续切片，进行HE染色;对E14天胚胎切片并进行Pax6,Tbr2,Tuj1免疫组化染色。取侧脑室壁最大横截面的切片，观察分析侧脑室壁背侧部位组织结构，对HE染色切片，观察细胞形态、测量不同分层的厚度;对免疫组化切片，分层计数阳性细胞数目。
结果:胚胎期暴露毒死蜱对侧脑室背侧各层细胞基本形态无明显影响，但是毒死蜱的早期暴露改变了细胞的分层结构，表现为E12天VZ层厚度减少了5.4％，PP层厚度增加了5.3％;E14天VZ、SVZ层厚度分别减少了1.3％和6.0％，IZ、CP层厚度分别增加了9.4％和12.1％;E16天VZ、SVZ层厚度分别减少了17.3％和11.1％，IZ、CP层厚度分别增加了20.9％和36.6％，E14组化分析显示，毒死蜱使APs表面标志Pax6+细胞减少了17.9％，但对神经元表面标志Tuj1+细胞无明显影响。即低浓度毒死蜱早期暴露表现出对增殖层的抑制和对分化层的促进作用，并且这种作用随着胚胎的发育愈加显著。
结论:本项研究显示胚胎早期毒死蜱暴露扰乱了神经前体细胞增殖分化进程，并由此导致侧脑室壁发育过程中神经发育毒性的顶底极性差异。