【摘 要】
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目的:为了建立快速检测Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒PCR方法.
方法:根据NCBI公布的来自中国不同省份的的Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒的基因序列,找出其保守序列,设计合成两对引
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室,哈尔滨150069
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目的:为了建立快速检测Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒PCR方法.
方法:根据NCBI公布的来自中国不同省份的的Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒的基因序列,找出其保守序列,设计合成两对引物,在一个PCR反应管中进行PCR反应,并进行条件优化.
结果:该方法敏感性高,最低能检出5.3pgⅠ型鸭肝炎病毒和2.7pg鸭瘟病毒的RNA或DNA模板.其特异性强,对番鸭细小病毒(MDPV),鹅细小病毒(GPV),新城疫病毒(NDV)和流感病毒(AIV),鸭减蛋综合征病毒(EDSV),禽网状内皮组织增生症病毒(REV),鸭坦布苏病毒(DTMUV),禽呼肠弧病毒(ARV)8种病毒的检测均为阴性,Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒检测结果为阳性.用建立的方法检测了江苏徐州采集的100份样品,Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒的阳性率分别为1.2%和26%.
结论:建立了Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒一步法PCR检测方法.
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