【摘 要】
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目的：20S蛋白酶体(proteasome)与细胞衰老密切相关。本研究将检测原代培养人视网膜色素上皮细胞(RPE)复制衰老过程中20S蛋白酶体活性、含量及分布的变化。方法：原代培养的
【机 构】
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第四军医大学西京医院眼科,陕西省西安市长乐西路17号
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目的：20S蛋白酶体(proteasome)与细胞衰老密切相关。本研究将检测原代培养人视网膜色素上皮细胞(RPE)复制衰老过程中20S蛋白酶体活性、含量及分布的变化。方法：原代培养的人RPE细胞传代,选择第2～4代、12～14代和22～24代细胞分别作为少年期、中年期和老年期细胞,显微镜观察、XTT法、β-半乳糖苷酶染色和流式细胞仪鉴定细胞衰老特征。荧光标记蛋白底物法测定蛋白酶体降解活性,western blot检测含量,免疫荧光法分析其分布和相对定量,PCR分析其活性亚基的表达水平。
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