论文部分内容阅读
目的:采用不同剂量阿司匹林干预BMSCs移植治疗大鼠缺血再灌注脑损伤,观察各组血清TNF-α浓度、神经功能评分、caspase-3表达,探讨阿司匹林干预对BMSCs移植治疗大鼠缺血再灌注脑损伤的影响及作用机理.
方法:利用线栓法制作SD大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO)(n=44).根据完全随机原则分为:模型自然恢复组(A组),BMSCs移植组(B组)、阿司匹林干预组(C组)和阿司匹林干预BMSCs移植组(D组).C、D组根据阿司匹林的剂量各分为三个亚组(阿司匹林剂量:C1、D1亚组3.75g/kg/d、C2、D2亚组7.5g/kg/d、C3、D3亚组22.5g/kg/d),C、D组各亚组在再灌注120小时后开始按照分组每日予以不同剂量阿司匹林,溶入1ml蒸馏水;灌胃A组为MCAO再灌注大鼠模型组;B、D组进行BMSCs移植,于缺血2小时再灌注146小时后,通过尾静脉各注射2×106 BMSCs 每只SD大鼠.第14天,分别检测血清TNF-α浓度,评价神经行为学评分,HE染色观察细胞形态结构,测定caspase-3的表达.
结果:1.神经行为学评分:A组3.76±0.42,B组2.04±0.28,C组:C1亚组3.91±0.35分、C2亚组3.83±0.62分、C3亚组3.92±0.60分,D组:D1亚组1.69±0.16分,D2亚组1.17±0.11分,D3亚组2.25±0.17分.A组与B组相比具有统计学差异(P<0.05),A组高于B组;A组与C组各亚组性比无统计学差异;A组与D组各亚组相比具有统计学差异(P<0.05),A组高于D组;B组与C组各亚组相比有统计学差异(P<0.05),C组高于B组;B组与D组各亚组相比有统计学差异(P<0.05),B组高于D组;C组各亚组与D组各亚组按剂量两两相比均具有统计学差异(P<0.05),C组高于D组;C组各亚组间两两相比无统计学差异((P>0.05);D组各亚组间两两相比有统计学差异(P<0.05),D1组最高,D2组最低.
2.血清TNF-a酶联免疫试剂盒测定:A组7.69±0.54,B组6.27±0.42,C组:C1亚组5.59±0.20分、C2亚组5.59±0.20分、C3亚组1.52±0.36分,D组:D1亚组4.76±0.52分,D2亚组2.47±0.36分,D3亚组0.75±0.18分.A组与B组相比具有统计学差异(P<0.05),A组高于B组:A组与C组各亚组性比有统计学差异(P<0.05),A组高于C组各亚组;A组与D组各亚组相比具有统计学差异(P<0.05),A组高于D组;B组与D组各亚组相比有统计学差异(P<0.05),B组高于D组;C组各亚组与D组各亚组按剂量两两相比均具有统计学差异(P<0.05),C组高于D组;C组各亚组间两两相比有统计学差异(P<0.05),Cl组最高,C3组最低;D组各亚组间两两相比有统计学差异(P<0.05),Dl组最高,D3组最低.
3.脑组织切片HE染色显示:A组组织明显水肿,神经细胞体积增大,空泡变性:细胞间隙增大;D组神经细胞数量多,胞浆丰富,细胞受损程度在各组中最轻,低倍镜下可见散在的小软化灶,其余组织结构相对较好.
4.caspase-3免疫组化染色:A组396.70±59.68,B组292.35±31.62,C组:C1亚组392.02±50.12,C2亚组382.59±31.06,C3亚组379.66±25.33,D组:D1组188.40±32.29.D2组120.43±13.04.D3组251.68±13.30.A组与B组相比具有统计学差异,A组高于B组;A组与C组各亚组性比无统计学差异;A组与D组各亚组相比具有统计学差异(P<0.05),A组高于D组;B组与C组各亚组相比有统计学差异(P>0.05),C组高于B组;B组与D组各亚组相比有统计学差异(P<0.05),B组高于D组;C组各亚组与D组各亚组按剂量两两相比均具有统计学差异(P<0.05),C组高于D组;C组各亚组间两两相比无统计学差异(P>0.05);D组各亚组间两两相比有统计学差异(P<0.05),D1亚组最高,D2亚组最低.
结论:1.阿司匹林干预在BMSCs移植治疗大鼠缺血再灌注脑损伤时可降低大鼠血清TNF-α的浓度,且阿司匹林的剂量与TNF-a的浓度呈负相关.
2.阿司匹林预干预可促进BMSCs移植治疗大鼠缺血再灌注脑损伤的效果,并与剂量相关,呈双向性,可能与阿司匹林低MCAO再灌注大鼠血清TNF-α的浓度有关.