【摘 要】
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目的:本实验以文献报道的睾丸支持细胞培养方法为基础,改进消化液的组合、消化时间及纯化方法,有效分离且较长期培养山羊睾丸支持细胞,为进一步探究和利用支持细胞奠定基础.
【机 构】
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青岛农业大学动物生殖发育与基因工程研究所,山东青岛266109
【出 处】
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中国动物学会细胞与分子显微技术学分会第十七次学术研讨会
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目的:本实验以文献报道的睾丸支持细胞培养方法为基础,改进消化液的组合、消化时间及纯化方法,有效分离且较长期培养山羊睾丸支持细胞,为进一步探究和利用支持细胞奠定基础.材料方法:本研究选取3月龄公羊作为实验动物,将山羊睾丸组织剪碎后经两种混合酶溶液(4mg/ml胶原酶Ⅳ与0.2%透明质酸酶混合液和0.25%胰酶与10μg/ml DNaseI混合液)次第消化,利用差速贴壁法纯化细胞悬液中的支持细胞,对培养72h的细胞经台盼蓝染色鉴定细胞活率,观察支持细胞形态学特征及生长增殖情况,油红O染色、H.E.染色及福尔根染色对支持细胞进行鉴定.结果:培养72h的细胞经台盼蓝染色显示活率达95%以上,且明胶铺被后更有利于细胞贴壁.由支持细胞生长曲线可以看出培养的细胞生长状况良好.
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