【摘 要】
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目的:建立并验证干细胞衰老模型,研究补肾益脑药巴戟天低聚糖通过线粒体途径延缓干细胞衰老的机制,揭示巴戟天低聚糖益脑作用的现代生物机制,为补肾要药巴戟天益脑功效提供理论依据,同时为传统补肾益脑功效的阐发提供研究实例和科学依据.方法:体外培养骨髓间充质干细胞(MSCs),用30g/L D-半乳糖诱导72小时制备MSCs衰老模型,并采用MTT法,β-半乳糖苷酶染色法等实验进行衰老细胞模型验证,然后实验分
【机 构】
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华南师范大学药物研究院,广东广州510631 广东省微生物所,广东广州
【出 处】
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第五届中国药理学会补益药药理专业委员会学术研讨会
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目的:建立并验证干细胞衰老模型,研究补肾益脑药巴戟天低聚糖通过线粒体途径延缓干细胞衰老的机制,揭示巴戟天低聚糖益脑作用的现代生物机制,为补肾要药巴戟天益脑功效提供理论依据,同时为传统补肾益脑功效的阐发提供研究实例和科学依据.方法:体外培养骨髓间充质干细胞(MSCs),用30g/L D-半乳糖诱导72小时制备MSCs衰老模型,并采用MTT法,β-半乳糖苷酶染色法等实验进行衰老细胞模型验证,然后实验分两组,一组在造模前加不同剂量(0、150、250mg/L)巴戟天低聚糖(BJT)处理,一组在造模后加BJT处理24小时后,使用相应的试剂盒检测线粒体功能相关因子如SOD、MDA、FiF0-ATPase、NADH-CoQ还原酶和ATP水平、并结合QT-PCR、westen-bolting等现代分子生物技术,观察巴戟天低聚糖对模型细胞增殖、凋亡和形态学,以及对线粒体功能,p16INK4a,P21Cip1/Waf1,Bcl-2,Bax,MICU1等相关基因和蛋白的影响.结果:成功建立衰老细胞模型;BJT通过修复线粒体功能延缓D-半乳糖诱导的衰老MSCs.巴戟天低聚糖处理后的细胞抗氧化活性和能量供应均有所提高,而衰老相关基因和蛋白(Bcl-2,Bax,MIUC-1,p16 and p21)回到正常水平.结论:巴戟天低聚糖通过缓解线粒体功能失调而阻止或修复衰老过程,其原因可能是线粒体能量代谢功能在衰老过程中起到重要作用.
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