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目的:建立从灵芝药材(Ganoderma ludcidum)中制备灵芝三萜酸对照品的研究方法。以HPTLC、HPLC方法研究灵芝药材的指纹图谱,并以此评价灵芝药材的质量。
方法:利用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析以及反相柱层析等方法进行分离纯化,通过理化性质和波谱技术鉴定其结构。应用硅胶GF254高效预制薄层板,通过二次展开,10%硫酸乙醇溶液显色后获得TLC荧光色谱指纹图谱:同时采用Diamonsil-C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5 μ m),流动相为乙腈和0.8%高氯酸水溶液,梯度洗脱,流速0.9mL·min-1,检测波长254nm,柱温为室温,在以上条件下建立灵芝HPLC指纹图谱。
结果:分离得到到灵芝酸A等6种灵芝三萜酸类化合物,用于灵芝质量标准的制定;灵芝TLC荧光色谱指纹图谱由9个特征荧光条斑组成,荧光色谱图像与轮廓扫描图谱结合分析比较,建立赤芝HPTLC指纹图谱模式;赤芝HPLC指纹图谱共有18个特征峰,其中6个化学成分通过对照品得到指认。
结论:该方法为综合评价灵芝的质量提供了科学的依据。