论文部分内容阅读
目的:探讨阿魏酸(Ferulic acid,FA)对糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)引起的脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells, BMEC)损伤的保护作用及其可能的机制.方法:混合气体法(95%N2+5%CO2)建立OGD体外模型,MTT法检测BMEC细胞活力,流式细胞术(MMP、ROS)和试剂盒(SOD、MDA、ATP)检测细胞氧化应激损伤以及线粒体功能,Western blotting检测线粒体断裂蛋白(Drp1、p-Drp1)和自噬相关蛋白(LC3β、Beclin1)的表达变化,荧光显微术及激光共聚焦显微术观察线粒体状态和自噬的发生.结果:FA能显著逆转OGD造成的BMEC细胞氧化应激损伤,包括提高细胞活力、降低ROS、MDA水平、提高SOD活性以及MMP和ATP值(P<0.01).此外,Western blotting结果显示LC3β及Beclin1表达增加,Drp1表达量减少(P<0.05).同时自噬激动剂雷帕霉素(rapamycin,Rapa)协同FA进一步诱导自噬的发生,而自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)和氯喹(chloroquine,CQ)则表现出抑制FA的作用,加剧线粒体功能的损伤.