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目的 筛选并鉴定出可能会作为免疫相关性全血细胞减少(immuno-related pancytopenia,IRP)患者骨髓造血细胞上的自身抗原。背景 IRP是一种免疫介导的血细胞减少症。前期研究发现IRP发病机制首先是某种原因引起T淋巴细胞调控失衡,Th2细胞比例增多导致B淋巴细胞数量/亚群/功能异常,进而产生抗骨髓未成熟造血细胞自身抗体并破坏或抑制骨髓造血,最后引起的血细胞减少症候群。但是IRP自身抗体所攻击的造血细胞上的靶抗原目前尚不明确,之前本中心利用SDS-PAGE联合免疫印迹法发现了几种靶抗原,包括G蛋白偶联受体(GPCR) 156变异体,P链人红细胞带3蛋白,乳铁蛋白及WD重复序列蛋白。自身免疫性疾病的靶抗原往往数个甚至数十个,所以以上方法所验证的抗原仅为极少数,因此本实验采用重组cDNA表达文库的血清学分析法(SEREX)继续寻找IRP自身抗体的靶抗原,并且进一步验证其抗原性。方法 我们构建了K562细胞的噬菌体展示文库,用它替代人骨髓CD34+细胞的蛋白文库。然后用IRP患者和正常健康对照血清对这个文库进行血清免疫学分析。噬菌体表达肿瘤相关蛋白的初步挑选是建立在患者与正常健康对照组患者的血清抗体的亲和力差别的基础上,噬菌斑经过与IRP患者血清孵育两轮筛选后,若阳性噬菌斑再与正常血清孵育呈阴性反应,则进行该阳性噬菌斑测序。