【摘 要】
：
MicroRNAs(miRNAs)是一类新发现的内源性非编码小RNA分子,它能调控细胞的增殖、分化与凋亡.最近研究提示,miRNAs在动物的精子发生中起重要作用.小鼠各阶段的生精细胞可以用STA-PUT方法得以分离,在这些生精细胞中差异表达miRNAs被发现.然而,人类睾丸组织各阶段生精细胞以及它们的miRNAs大规模表达谱尚未见报道.由于人类男性生殖细胞的细胞类型、生化表型与啮齿类动物不同,因此
【机 构】
：
上海交通大学医学院附属仁济医院干细胞中心泌尿外科,上海市人类精子库,上海200127,中国
【出 处】
：
GTAUF2014 & APSMHA2014第六届长城泌尿男科转化医学论坛暨第七届亚太男性健康与抗衰老研究学会年会
论文部分内容阅读
MicroRNAs(miRNAs)是一类新发现的内源性非编码小RNA分子,它能调控细胞的增殖、分化与凋亡.最近研究提示,miRNAs在动物的精子发生中起重要作用.小鼠各阶段的生精细胞可以用STA-PUT方法得以分离,在这些生精细胞中差异表达miRNAs被发现.然而,人类睾丸组织各阶段生精细胞以及它们的miRNAs大规模表达谱尚未见报道.由于人类男性生殖细胞的细胞类型、生化表型与啮齿类动物不同,因此分离人类各种生精细胞,揭示调控人类精子发生不同阶段的miRNAs差异表达谱具有十分重要意义.本研究我们采用STA-PUT梯度沉降法分离了人类精原细胞、粗线期精母细胞、圆形精子细胞.免疫细胞化学和减数分裂细胞铺展方法显示,分离的人精原细胞、粗线期精母细胞和圆形精子细胞纯度达到90％；形态学实验和各阶段生精细胞的特异性基因表达检测进一步验证了这些结果.我们运用miRNAs芯片比较了人精原细胞、粗线期精母细胞、圆形精子细胞的大规模miRNA表达谱.结果显示,32种miRNAs在人精原细胞的表达显著高于粗线期精母细胞；相反,78种miRNAs在人精原细胞的表达明显低于粗线期精母细胞,表明这些miRNAs可能在有丝分裂和减数分裂的起始阶段起作用.我们同时发现,144种miRNAs在粗线期精母细胞的表达明显高于圆形精子细胞,而29种miRNAs在粗线期精母细胞的表达显著低于圆形精子细胞,提示这些miRNAs可能在精子变形过程中起重要的调控作用.实时定量PCR验证了人类生殖细胞的上述差异表达的miRNAs.并且,我们对这些差异表达的miRNAs的靶位进行了预测和鉴定.本研究建立了高效分离人精原细胞、粗线期精母细胞、圆形精子细胞的技术平台,揭示了这些生精细胞miRNAs的大规模差异表达谱,为理解人类精子发生过程提供新的小RNA调控机制,并为男性不育的诊断和治疗提供新的靶标.
其他文献
功率半导体器件主要用于电能处理的,是电力电子与节能减排装备的核心基础器件。在目前复杂的国际环境与"双碳" 目标下,加速发展我国的功率半导体产业意义重大。中国是全球功率半导体最大的市场,占据了 40%以上的世界市场份额。但受多种因素影响,我国的半导体行业长期以来的整体实力和国际先进水平相比存在一定差距。近年,中国功率半导体产业在国家政策推动和行业市场导向下得到了迅速发展,
时光如梭,功率半导体行业联盟从2014年成立之初的25家发起单位,发展到如今的90余家成员单位,不知不觉间已经走过了 7年。回首这7年的发展,我们始终坚守初心、勇担使命,携手共建功率半导体产业生态圈,致力于振兴民族工业之"芯"。在众多成员单位的共同努力下,7年间,我们取得了丰硕的成果,为国家功率半导体的自主安全起到了积极作用。
介绍了现代硅基大功率半导体器件的历史演变和新型器件结构的研究进展,以及宽禁带半导体材料和器件的现状;阐述了国内大功率半导体器件在轨道交通、直流输电和新能源汽车等领域的研发进展和应用现状;最后讨论了大功率半导体技术面临的技术挑战和发展趋势。
目的:探讨软性膀胱镜下留置尿管术对于急诊缓解急性尿潴留的临床应用价值.方法:回顾性分析2012年1月-2013年4月我院收治的21例急性尿潴留患者的临床病例资料,均为男性患者,年龄27～71岁,所有患者均为急性无法自主排尿,于外院或本院常规留置尿管失败,入院后在急诊局麻下行软膀胱镜下留置尿管术.
目的:探讨提高对非典型肾脏占位性病变的诊断水平,选择合理治疗方案.方法:回顾性分析我院自2010年6月～2013年6月间术前被诊为肾癌的肾脏占位性病变或术前临床及影像表现不典型肾脏占位患者12例,男8例,女4例,年龄47～78岁,平均61岁.结果:体检超声偶然发现5例,间断高热4例,腰部胀痛不适6例,伴血尿3例.术前均行彩色多普勒超声、CT、MRI等影像学检查.其中B超表现低回声7例,不规则强回声
目的:探讨采用输尿管软镜联合钬激光碎石术在处理成人上尿路结石中的临床价值.方法:采用输尿管软镜联合钬激光碎石术治疗成人上尿路结石80例.男性38例,女性42例;年龄32～74岁;左侧22例,右侧17例,双侧41例.其中包括输尿管上段结石37例;输尿管合并肾上、中、下盏结石23例;肾结石20例:肾盂结石9例,肾上盏结石3例,肾中盏结石3例,肾下盏结石5例(其中PCNL术后残留结石5例:上盏结石2例,
背景和目的:精索的显微结构解剖成为了显微手术过程中重要的客观依据和基础.本研究用连续组织切片基础上对精索进行初步三维重建,以期获得更精确的显微结构解剖信息.方法:从成年男性尸体取材精索,制作好石蜡切片分别进行HE染色、天狼星红-饱和苦味酸染色、银浸染色和免疫组化染色.在腹股沟管水平和外环口下水平的进行统计并用mimics软件,完成三维重建.结果:(Ⅰ)提睾肌内有两层独立筋膜,分别包绕精索内血管丛和
目的:调查沪浙社区中老年男性良性前列腺增生症(BPH)的患病情况,分析其发病相关因素,为降低BPH患病率提供流行病学依据.方法:按照整群及年龄分层、随机不等比例的抽样方法,对上海城市社区及浙江省农村地区共2 000例40～70岁的常住中老年人群作为调查对象,分别自行记录国际前列腺症状评分(IPSS)评估下尿路症状(LUTS),经直肠超声检测前列腺各径线的大小并计算其体积(PV),结果进行方差分析.
目的:严重男性不育诊疗中,发现的微量精子弥足珍贵,有时需要对其再冻融用于未来ART周期,但目前缺少适合的冷冻载体与方法.本文探讨微量精子超细管法再冻融对复苏率及受精功能的影响,验证再冻融精子的可行性,寻找最优的精子再冻融载体.方法:选取上海市人类精子库100份健康捐精志愿者(符合卫生部捐精标准)的精液标本.经常规冷冻管冻融后,采用非连续密度梯度离心方法,去除保护剂和死精子,富集运动活力较好的精子;