表达ORFV F1L基因的重组山羊痘病毒的构建及初步鉴定

来源 :中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:libra_15
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为了研制安全有效的预防羊口疮的重组山羊痘病毒活载体疫苗。本研究通过PCR技术从ORFV-shz分离株基因组中扩增目的基因F1L,将获得的基因片段与载体pUC-TK12连接,同时酶切插入LacZ筛选报告基因和Pb56双向启动子,构建重组转移载体pUC-TK12-LacZ-F1L,将其转染至己感染山羊痘病毒疫苗株的BHK-21细胞,进行同源重组。通过蚀斑筛选挑取蓝色蚀斑,收获重组山羊痘病毒并进行PCR初步鉴定。结果显示获得了全长1023bp的F1L基因,并构建了重组转移载体,转染BHK-21细胞后进行同源重组,成功获得了携带F1L基因的重组山羊痘病毒。本研究成功获得了含有羊传染性脓疽病毒F1L基因的重组山羊痘病毒疫苗候选株rGPV-F1L,为羊传染性脓疱病基因工程活载体疫苗的研制奠定基础。
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