【摘 要】
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目的 研究靶向egfr基因微RNA(miRNA)-7对裸鼠人胃癌种植瘤的影响及其作用机制,探讨其在胃癌增殖中的作用.方法 培养人胃癌细胞MGC 803细胞系.使用BABL/c裸鼠建立人胃癌种
【机 构】
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421000衡阳,南华大学附属第二医院消化科
【出 处】
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The 14th Congress of Gastroenterology China(第十四届全国消化系病学术会议)
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目的 研究靶向egfr基因微RNA(miRNA)-7对裸鼠人胃癌种植瘤的影响及其作用机制,探讨其在胃癌增殖中的作用.方法 培养人胃癌细胞MGC 803细胞系.使用BABL/c裸鼠建立人胃癌种植瘤动物模型,当种植瘤体积达到60 mm3左右,随机分为3组,实验组(瘤内转染miRNA-7模拟物组),阴性对照组(瘤内转染无意义序列组),空白对照组.Lipofectamine 2000瞬转增加肿瘤组织中miRNA-7表达,观察肿瘤生长情况；运用双荧光素酶报告基因检测验证egfr基因是否为miRNA-7的靶基因.采用实时PCR检测三组裸鼠人胃癌种植瘤egfr基因的信使核糖核酸(mRNA)转录水平,采用免疫组织化学法检测表面生长因子受体蛋白表达情况.结果 体内转染miRNA-7模拟物组肿瘤生长较阴性对照组和空白对照组肿瘤生长明显缓慢.实时PCR检测各组种植瘤中miRNA-7模拟物表达水平,相对于空白组、阴性对照组,miRNA-7模拟物组种植瘤的miRNA-7表达水平明显上升.miRNA-7转染组较转染阴性对照组、转染试剂对照组及未处理组egfr基因的mRNA及蛋白表达水平均降低.结论 通过促进胃癌种植瘤miRNA7的表达可以抑制肿瘤生长,说明miRNA-7的靶基因中存在与肿瘤增值有关的基因.miRNA-7能够下调egfr基因mRNA及蛋白质的表达从而抑制胃癌细胞生长.
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