【摘 要】
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目的:研究铜锌超氧化物歧化酶(Cu, Zn-Superoxide dismutase,Cu, Zn-SOD)经低分子肝素(Low molecular weight heparin,LMWH)化学修饰前后蛋白分子二级结构的变化. 方法:使
【机 构】
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山东大学药学院生化与生物技术药物研究所,山东,济南,250012
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目的:研究铜锌超氧化物歧化酶(Cu, Zn-Superoxide dismutase,Cu, Zn-SOD)经低分子肝素(Low molecular weight heparin,LMWH)化学修饰前后蛋白分子二级结构的变化.
方法:使用KBr法、溶剂挥发成膜法和液体膜法测定Cu, Zn-SOD和LMWH修饰后结合物(LWMH-SOD)的傅立叶转换红外(FTIR)谱,并利用傅立叶去卷积和二阶求导技术对获得谱图的酰胺Ⅰ带(1700～1600cm-1)进行计算机分峰和图谱拟合来分析不同物理状态下Cu, Zn-SOD和LMWH-SOD酶蛋白分子的二级结构,同时,运用圆二色谱(CD谱)技术对修饰前后酶蛋白分子的二级结构变化进行佐证分析.
结果:FTIR和CD分析结果表明,LMWH-SOD与Cu, Zn-SOD相比,酶蛋白分子二级结构中α-螺旋构象比例上升,β-构象成分比例接近且在两者中均为主要构象成分.
结论:Cu, Zn-SOD和LMWH-SOD结合物二级结构中均以β-构象为优势构象,使用LMWH进行适当的化学修饰,主要是影响酶蛋白分子二级结构中的α-螺旋构象,使其含量上升,对酶蛋白优势构象同时也是构成酶分子活性中心的β-构象的影响微弱.
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