【摘 要】
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目的 在细胞及动物水平探讨N-乙酚氨基葡萄糖转移酶V(GnT-V)表达下调对胆囊癌细胞增殖、侵袭、迁移等肿瘤恶性行为及体内致瘤性的影响,并通过转录组测序分析初步探究其可
【机 构】
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上海东方肝胆外科医院;福建医科大学第一临床医学院上海东方肝胆外科医院
【出 处】
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第三次全国中西医结合检验医学学术会议
论文部分内容阅读
目的 在细胞及动物水平探讨N-乙酚氨基葡萄糖转移酶V(GnT-V)表达下调对胆囊癌细胞增殖、侵袭、迁移等肿瘤恶性行为及体内致瘤性的影响,并通过转录组测序分析初步探究其可能作用机制.方法 检测三株胆囊癌细胞株中GnT-V 表达水平,采用小干扰RNA 对表达水平最高细胞株的GnT-V 基因进行干扰,将细胞分为GnT-V 干扰组(iRNA 组)及非干扰组(iNC 组)；通过CCK-8 实验、Transwell 实验及划痕实验检测两组细胞的增殖、侵袭及迁移能力的改变；通过裸鼠荷瘤实验观察两组细胞的体内致瘤能力的变化；采用转录组测序技术进一步探究相关基因及信号通路的改变.结果 CCK-8 实验、Transwell 实验及划痕实验结果表明：GnT-V 干扰组细胞的增殖、侵袭及迁移能力均降低；裸鼠荷瘤实验结果显示：GnT-V干扰组肿瘤体积及重量(790.65±105.02 mm3 及0.77±0.35g)均低于iNC 组(2499.44±103.28 mm3 及1.56±0.37g),差异有统计学意义(P<0.05)；转录组测序结果揭示：两组共同表达基因有23609 个(r=0.989).根据两组间FPKM 表达量P<0.05 筛选可得412 个差异表达基因(DEGs),其中GnT-V 干扰组表达上调基因有264 个,主要与核酸结合蛋白相关；而表达下调基因有148 个,主要与受体蛋白相关.进一步筛选可获得6 个DEGs(即：CGA、EGR1、HAL、PCK1、RASSF9 及TNNT2).其中,CGA 及RASSF9 在癌组织中高表达,EGR1 在癌旁组织中高表达,而HAL、PCK1 及TNNT2 基因在两组中表达无明显差异.结论 体内外研究表明：GnT-V 表达下调可抑制胆囊癌细胞的增殖、侵袭、迁移及体内致瘤能力,同时GnT-V 表达下调可引起CGA、EGR1 及RASSF9 基因表达水平改变,进一步引起相关通路的变化.
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