抗隐孢子虫鼠基因型CP15/60蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

来源 :中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zyz118
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为获得高特异性的抗隐孢子虫单克隆抗(monoclonal antibody,McAb),以大肠杆菌中高效表达的隐孢子虫鼠基因型子孢子表面抗原CP15/60为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠。 取脾细胞与SP2/0细胞融合,融合阳性细胞用间接ELISA方法进行筛选,有限稀释法3-4次克隆纯化,获得8株能稳定分泌抗隐孢子虫鼠基因型CP15/60蛋白的McAb杂交瘤细胞株,其接种产生的小鼠腹水和细胞培养液上清的最高效价分别可达1:276800和1:2800。对腹水效价较高的B4F7、D8H52株McAb进行染色体分析、亚型鉴定、亲和力测定、交叉反应性测定、Western blot检测以及分子量大小测定。结果显示其染色体数目为90-110,亚型均为IgG1,重链、轻链大小分别约为56 ku和27 ku,与球虫、血吸虫以及弓形虫无交叉反应,并具有良好的亚型特异性。表明获得了高特异性的抗隐孢子虫McAb。
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