痰热清注射液对LPS诱导的气道上皮细胞HBE16粘液高分泌状态的剂量效应关系研究

来源 :第十四次全国中西医结合防治呼吸系统疾病学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zyu03
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  目地:评价痰热清注射液对LPS诱导的气道上皮细胞HBE16粘液高分泌状态的剂量效应关系。方法:利用CCK-8法探索LPS刺激HBE16细胞构建体外炎症模型最佳的处理时间与处理浓度。利用CCK-8法探索痰热清注射液及其君药有效成分黄芩苷对HBE16细胞最大的处理浓度。 根据筛选出的药物最大处理浓度选择合适的处理浓度进行干预分组,主要分为对照组、LPS组、LPS加药物干预组(痰热清注射液5个不同浓度组:1:32-1:512,黄芩苷3个不同浓度组:10 μ g/ml、50 μ g/ml、100μ g/ml)等;利用ELISA法检测系列浓度的痰热清注射液及黄芩苷对LPS所致的HBE16细胞炎症干预不同时间的MUC5AC在细胞培养上清液中表达水平。利用RT-PCR法检测系列浓度的痰热清注射液及黄芩苷对LPS所致的HBE16细胞炎症干预不同时间的炎症因子MUC5AC mRNA在RNA中表达水平。利用Western blotting法检测系列浓度的痰热清注射液及黄芩苷对LPS所致的HBE16细胞炎症干预24小时的NF-K B信号通路中关键蛋白phospho-Iκ B-α、phospho-IKKα/β、phospho-NF-κ B p65在细胞核蛋白中的表达水平。
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