【摘 要】
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目的 应用改良的清洁剂联合酶消化法获取气管的细胞外基质材料,并观察该方法的脱细胞效率以及对气管基质完整性和材料细胞化的影响。方法 将Brown Norway(BN)大鼠作为气
【机 构】
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中国医学科学院整形外科医院整形十一科
【出 处】
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2014中华医学会整形外科分会第十三次全国学术交流会
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目的 应用改良的清洁剂联合酶消化法获取气管的细胞外基质材料,并观察该方法的脱细胞效率以及对气管基质完整性和材料细胞化的影响。方法 将Brown Norway(BN)大鼠作为气管组织的供体,并用清洁剂联合酶消化的方法对取材的气管进行脱细胞处理。用DAPI染色,DNA定量分析和Ⅰ、Ⅱ型主要组织相容性(抗原)复合物(MHC？Ⅰ？和Ⅱ)的免疫组织化学染色来鉴定细胞及抗原成份的脱除效率。应用组织学和生物化学定量分析法来检测气管基质成分葡萄糖胺聚糖(GAG)和胶原的保留效率,并通过组织学和扫描电子显微镜检查来观察材料的组织结构和表面显微结构的变化,同时对材料进行压缩和拉伸实验用来评估脱细胞处理之后的生物力学特性的变化。用接触和提取液细胞毒性实验来检测材料的生物相容性,并将软骨诱导的大鼠骨髓间充质干细胞和气管上皮细胞分别接种在材料上观察细胞与材料的相互作用。结果 在经过5次脱细胞循环的处理后,材料中的抗原成份被完全去除,但仍残留少量的核成份以及细胞残片。脱细胞材料的细胞外基质的胶原成分被基本保留,但GAG成份有显著的丢失。脱细胞材料的组织结构和表面显微结构未遭到明显的破坏,脱细胞气管材料的伸张性和抗拉的强度没有明显变化,但刚度有所下降。材料以及其提取液对细胞没有毒性,而且材料支持骨髓间充质干细胞和气管上皮细胞的黏附和增殖。
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