【摘 要】
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目的:探索炎症及缺氧预处理对牙周膜干细胞体内(外)性能的影响。方法:将牙周膜干细胞分别进行24小时的炎症或(和)缺氧预处理后。平板划痕实验和Transwell实验分析并比较细胞
【机 构】
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第四军医大学口腔医院军事口腔医学国家重点实验室牙周科;
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目的:探索炎症及缺氧预处理对牙周膜干细胞体内(外)性能的影响。方法:将牙周膜干细胞分别进行24小时的炎症或(和)缺氧预处理后。平板划痕实验和Transwell实验分析并比较细胞的迁移能力;MTT法、克隆形成率检测并比较细胞的增值能力;RT-PCR和Western blot检测成骨和成脂相关基因及蛋白的表达水平;H&E染色和免疫组化分析不同预处理对细胞膜片形成及胞外基质分泌的影响;Micro-CT和组织学切片检测并比较异位骨再生和原位牙周组织再生的情况。结果:24小时的缺氧预处理显著促进牙周膜干细胞的迁移。经过缺氧预处理的细胞,其克隆形成和增殖能力显著增强。炎症和缺氧的双重刺激尽管能提高细胞的克隆形成能力,但是对细胞的增殖没有影响。同时,缺氧预处理会上调细胞成骨相关蛋白RUNX-2和ALP的表达。而炎症刺激会下调细胞OCN蛋白的表达。双重刺激会促使细胞的RUNX-2和OCN基因表达水平下调。尽管各种刺激对膜片胞外基质的分泌没有影响,但缺氧预处理会使形成的膜片变厚;而炎症刺激则使形成的膜片变薄。在异位骨再生和原位牙周组织再生的实验中,各组中形成的膜片均具有良好的骨形成能力。其中,缺氧预处理后的细胞所形成的新生骨最多。此外,只有经过缺氧预处理和未加处理的细胞能够在牙周缺损部位再生出牙骨质和牙周膜样结构。结论:短时的缺氧预处理可以改善牙周膜干细胞在体外的生物学表现,并且增强其体内再生的潜能。对牙周膜干细胞来说,合适的炎症刺激和双重刺激条件需要进一步的研究和探索。
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