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以本实验室从河北分离到的TGEV毒株,采用RT-PCR技术扩增了TGEVN基因,长为1149bp,并进行亚克隆重组到PMD18-T质粒载体上,连接、转化、鉴定后得到阳性重组质粒,命名为pTN,将重组质粒插入的片段进行序列分析和比较,结果表明TGEV河北分离株N基因与国外的Purdue-115、FS772/70/TO14、96-1933株均具有较高的同源性,达95%以上。并将目的基因与原核表达载体pGEX-4T-3重组,成功构建了原核表达载体pGEX-N。重组质粒转化至宿主菌BL21中,用IPTG诱导表达,对表达的蛋白用SDS-PAGE电泳、免疫印迹和薄层凝胶扫描分析。结果表明,表达产物与理论推测的分子量一致;表达蛋白约占菌体蛋白总量的22%;免疫印迹结果证明,表达的N蛋白可被TGEV阳性血清所识别。