【摘 要】
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目的:研究提纯的小鼠Eos在PMA+MA刺激后Eos细胞表面分子CD69表达与存活率的动力学改变,观察不同浓度不同细胞因子培养Eos后CD69的表达与细胞的存活率.方法:提纯IL-5高分泌转
【机 构】
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浙江大学医学院附属二院呼吸内科,浙江大学呼吸病研究所,杭州,310009
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目的:研究提纯的小鼠Eos在PMA+MA刺激后Eos细胞表面分子CD69表达与存活率的动力学改变,观察不同浓度不同细胞因子培养Eos后CD69的表达与细胞的存活率.方法:提纯IL-5高分泌转基因-小鼠外周血Eos,测定其CD69的表达,体外培养以PMA+MA刺激Eos1h、12h、18h、24h后测定细胞表面CD69的表达与细胞存活率;分别以1ng/ml、10ng/mi、100ng/mi的IL-4、IL-5、IL-12、IL=13、TNF-γ、GM-CSF培养细胞18小时后测定细胞的存活率与表面CD69的表达.结果:新鲜提纯的小鼠外周血Eos并不表达CD69,以台盼蓝测定其存活率＞97％.体外培养过程中细胞有自发的细胞凋亡及CD69的表达,而PMA+MA刺激的Eos在1h后既有CD69的表达,12小时至高峰,至少持续24小时以上.但PNA+MA刺激使细胞的存活率快速下降.不同细胞因子对Eos的培养均可有CD69的表达上升,其中IFN-γ、GM-CSF对此影响明显,而TFN-γ对细胞的存活率无明显影响.而IL-5、GM-CSF可明显增加Eos的存活率.不同浓度对细胞因子的作用无明显影响.结论:静止的小鼠外周血Eos表面并不表达CD69,体外培养Eos有细胞自发的凋亡与CD69的表达,PMA+MA刺激可使CD69的表达明显增高并促进Eos的凋亡增加.IL-5、GM-CSF可抑制细胞的凋亡,其中GM-CSF还可引起CD69表达的显著增高.TNF-γ可促进CD69的表达增加,但对细胞凋亡无影响.
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