体外热刺激对脐静脉血管内皮细胞caspase-3表达影响的研究

来源 :第十八届针灸对机体功能的调节机制及针灸临床独特经验研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qingfengliangban
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目的:研究体外热刺激对人脐静脉血管内皮细胞中(HUVECs)caspase-3基因和蛋白表达的影响,探讨体外温热刺激的抗凋亡及促凋亡的效应机制. 方法:原代HUVECs分为正常组(37℃)、适宜温热刺激组(40℃)和凋亡组(43℃),正常组不做任何处理,适宜温热刺激组置于40℃培养箱刺激30min,凋亡组置于43℃培养箱中刺激30min,每天2次,各组于第1天、2天、3天刺激结束4h后用MTT比色法检测HUVECs生长活力,第3天用QPCR和Western blot技术检测caspase-3基因和蛋白表达. 结果:三组HUVECS生长活力逐渐增强,与第1天和第2天比差异均有统计学意义(P<0.001);每天适宜温热刺激组细胞生长活力较正常组增强,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.05);每天凋亡组细胞生长活力较正常组减弱,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.001).第3天,与正常组比,适宜温热刺激组HUVECS内caspase-3的基因和蛋白表达均降低(P<0.001),凋亡组HUVECS内caspase-3的基因和蛋白表达均升高(P<0.05),凋亡组与适宜温热刺激组比,HUVECS内caspase-3的基因和蛋白表达均升高(P<0.001). 结论:体外热刺激可调控HUVECs内的caspase-3表达来调控细胞凋亡的过程,为全面认识灸法“扶助正气”的生物学机制提供新的实验依据.
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