【摘 要】
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目的：αB-Crystallin(CRYAB)属于小热休克蛋白家族,能够抵抗多种物理、化学因素诱导的细胞凋亡,与多种肿瘤发生发展过程相关.本实验室前期研究结果显示,与正常胃组织相比,αB-Crystallin在胃癌组织中表达上调,并且αB-Crystallin的表达水平与胃癌患者T分期显著相关.本课题旨在研究αB-Crystallin是否能够抵抗由化疗药物顺铂诱导的胃癌细胞凋亡,并探讨其相关机制.
【机 构】
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北京协和医学院 中国医学科学院肿瘤研究所病因及癌变研究室;癌发生及预防分子机理北京市重点实验室 分子肿瘤学国家重点实验室
【出 处】
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第八届中国肿瘤内科大会、第三届中国肿瘤医师大会暨中国抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会2014年学术年会
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目的：αB-Crystallin(CRYAB)属于小热休克蛋白家族,能够抵抗多种物理、化学因素诱导的细胞凋亡,与多种肿瘤发生发展过程相关.本实验室前期研究结果显示,与正常胃组织相比,αB-Crystallin在胃癌组织中表达上调,并且αB-Crystallin的表达水平与胃癌患者T分期显著相关.本课题旨在研究αB-Crystallin是否能够抵抗由化疗药物顺铂诱导的胃癌细胞凋亡,并探讨其相关机制.
方法：构建αB-Crystallin真核表达质粒PCDB-CRYAB,通过转染、G418筛选和免疫印迹等方法建立稳定表达αB-Crystallin的胃癌细胞系BGC823/PCDB-CRYAB,以及稳定表达空载的对照细胞系BGC823/PCDB.以不同浓度的化疗药物顺铂(0、1、2、2.5、5、8、10μg/ml)作用于BGC823/PCDB-CRYAB和BGC823/PCDB24h,通过MTT法检测细胞存活率并绘制曲线;通过流式细胞仪技术检测细胞凋亡率;通过免疫印迹方法检测凋亡相关信号通路的改变情况.
结果：在顺铂处理的条件下,与稳定转染空载质粒的BGC823/PCDB细胞相比,BGC823/PCDB-CRYAB细胞存活率较高,凋亡率较低;免疫印迹结果显示,BGC823/PCDB-CRYAB细胞的caspase-3活化程度低于对照组BGC823/PCDB.
结论：在胃癌细胞系BGC823中,αB-Crystallin可能通过抑制caspase-3活化而抑制由化疗药物顺铂诱导的细胞凋亡,提示αB-Crystallin可能作为胃癌化疗耐药性研究的潜在靶点.
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