葡多酚对小鼠乙醇性损伤肝细胞Caspase-3和PCNA表达的影响

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【目的】观察葡多酚(GPC)对小鼠乙醇性损伤肝细胞PCNA和Caspase-3表达的影响。【方法】1)将小鼠随机分为正常对照组,乙醇对照组和GPC低、中、高剂量组5组,除正常对照组外,其余四组小鼠均每天经口灌胃给予4g/kg bw乙醇,同时分别给予不同剂量的GPC,正常对照组只给蒸馏水。小鼠每日灌胃1次,30d后处死,测定肝重、体重和肝脏指数,取肝组织用免疫组化法检测Caspase-3和PCNA表达水平。2)将正常小鼠肝脏匀浆制成肝细胞悬液,加入RPMI1640培养基,调细胞密度至1×10~6/ml,接种于96孔培养板(0.1m1/孔),乙醇对照组和GPC各剂量组加入乙醇10ml/L,同时GPC各剂量组分别加入不同浓度的GPC0.1 ml置于37℃,5%C02培养箱中培养,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定肝细胞增殖活性。【结果】1)Caspase-3阳性表达细胞的胞浆中出现棕黄色或褐色颗粒。本实验GPC高剂量组Caspase-3蛋白阳性细胞数少,染色浅,呈弱表达,其阳性表达率为11.48%。乙醇对照组的阳性细胞数多,染色深,呈强表达,阳性表达率为34.30%。两组差异有统计学意义(P<0.05)。PCNA为胞核表达,呈棕黄色或褐色颗粒。本实验GPC高剂量组PCNA.阳性表达的细胞多,染色深。乙醇对照组则阳性表达细胞数少,染色浅。两组阳性细胞表达率分别为39.26%和9.5%,差异具有统计学意义(p<0.05)。2)GPC高剂量组和乙醇对照组的肝细胞增殖活性分别为0.423±0.125和0.306±0.063。两组间差别具有统计学意义(p<0.05)。【结论】GPC可抑制乙醇诱发的小鼠肝细胞增殖损伤,降低肝细胞中Caspase-3的表达,从而抑制乙醇损伤肝细胞的凋亡,对小鼠乙醇性肝损伤有一定的防护作用。
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