【摘 要】
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目的 构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)潜伏相关转录体(LAT)开放读码框1真核表达载体pEGFP-C2/LAT ORF1,并通过转染非洲绿猴肾细胞(Vero),验证载体的体外表达情况。方法 根
【机 构】
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华南理工大学生物科学与工程学院,510006
【出 处】
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第十三届全军皮肤科学术会议、第二届武警部队皮肤科学术会议、第十二届沈阳军区皮肤科学术会议
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目的 构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)潜伏相关转录体(LAT)开放读码框1真核表达载体pEGFP-C2/LAT ORF1,并通过转染非洲绿猴肾细胞(Vero),验证载体的体外表达情况。方法 根据HSV-Ⅱ LAT ORF1基因序列设计一对引物,以HSV-Ⅱ 333标准株基因组为模板PCR法扩增出ORF1基因,克隆至真核表达载体pEGFP-C2载体上,并对重组子pEGFP-C2/LAT ORF1进行酶切鉴定以及测序；利用X-fect转染试剂盒将重组质粒pEGFP-C2/LAT ORF1转染vero细胞,RT-PCR检测其mRNA水平的表达,并用荧光倒置显微镜观察融合蛋白的表达。
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