【摘 要】
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目的：越来越多的证据显示microRNA(miRNAs)的调节异常与恶性肿瘤的转归息息相关.本研究意在探讨miR-650参与调控肺腺癌细胞多西他赛耐药的分子机制和临床意义.方法：实时定量PCR法用于检测肺腺癌组织和细胞中miR-650的表达;免疫印迹法和免疫组织化学法用以检测体内外ING4表达;运用MTT和克隆形成实验评估化疗药物敏感性变化;流式细胞技术、Hoechst染色和caspase-3活性
【机 构】
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南京军区南京总医院肿瘤内科 南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学实验室
【出 处】
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第八届中国肿瘤内科大会、第三届中国肿瘤医师大会暨中国抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会2014年学术年会
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目的：越来越多的证据显示microRNA(miRNAs)的调节异常与恶性肿瘤的转归息息相关.本研究意在探讨miR-650参与调控肺腺癌细胞多西他赛耐药的分子机制和临床意义.
方法：实时定量PCR法用于检测肺腺癌组织和细胞中miR-650的表达;免疫印迹法和免疫组织化学法用以检测体内外ING4表达;运用MTT和克隆形成实验评估化疗药物敏感性变化;流式细胞技术、Hoechst染色和caspase-3活性检测被用于验证细胞凋亡率;荧光素酶活性实验被用于验证miR-650下游靶基因;所有数据均通过统计学分析.
结果：miR-650在肺腺癌组织中的表达显著高于癌旁组织.高表达的miR-650作为独立预后因素,与淋巴结转移,临床晚期和肺腺癌病人预后不良密切联系.深入研究证实miR-650在肺腺癌中与以多西他赛为主化疗的疗效反应亦有关.沉默miR-650能促进体外化疗敏感性增加,上调miR-650诱导体内外化疗抵抗增强.此外,抑制miR-650激活了caspase-3依赖的凋亡途径,它可能与Bcl-2/Bax的比值降低有关.进一步研究提示生长抑制因子4(ING4)为miR-650的直接靶基因,下调或上调ING4的表达能够在人肺腺癌多西他赛耐药细胞和亲本细胞中,部分逆转由miR-650单链抑制物和化学模拟物调控引起的效应.ING4在对多西他赛敏感的肺腺癌组织中高表达,它与miR-650的表达呈现负相关.
结论：miR-650作为新型人肺腺癌预后指标,对以多西他赛为主的化疗方案敏感性和疗效评价提供了一定的靶向依据.
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