1型鸭肝炎病毒E53株VP1基因的原核表达及多克隆抗体的制备

来源 :第三届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨“瑞普杯”新思想、新方法、新观点论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chaosum

【摘要】

：

【作者】

：

付培芬李鑫母晓宇董井全何召庆马波王君伟

【机构】

：

东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨,150030;天津瑞普生物技术股份有限公司,天津,300308

【出处】

：

第三届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨“瑞普杯”新思想、新方法、新观点论坛

【发表日期】

：

2012年5期

【关键词】

：

1型鸭肝炎病毒 VP1基因原核表达多克隆抗体免疫原性

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

　　利用RT-PCR技术扩增1型鸭肝炎病毒(DHV-1)E53株VP1基因序列,将其连入pET-30a载体中,构建原核表达载体pET-30a-VP1,并转化至宿主菌Rosetta(DE53)plysS中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析表明VP1蛋白在大肠杆菌中获得了表达,western blot表明表达产物具有良好的反应原性.将表达产物纯化后免疫新西兰大白兔,制备的多克隆抗体可特异性识别DHV-1,间接ELISA测定多克隆抗体效价达1∶12800,中和实验测定多克隆抗体中和抗体效价达1∶32.本研究表达的蛋白和制备的多克隆抗体为VP1蛋白功能的进一步研究和诊断制剂的开发提供了重要数据和材料.

其他文献

2011年我国部分地区猪瘟病毒分子流行病学研究

本研究对2011年我国部分地区养猪场采集组织样本209份,分别用FQ-RT-PCR和RT-nPCR两种方法检测猪瘟病毒(CSFV).结果FQ-RT-PCR检测出55份阳性病料,RT-nPCR检测出53份阳性,2种方法符合率达96.3％.将53份阳性产物进行测序及同源性分析,显示这53流行株均为2.1基因亚型.所分离的流行株与疫苗株(HCLV)和石门株(SM)的核苷酸同源性分别为为79.4％～83.

会议

猪瘟病毒分子流行病学基因序列免疫保护

鸡传染性法氏囊病VP2基因在果蝇S2细胞中的表达与鉴定

目的：利用果蝇S2细胞表达IBDV VP2融合蛋白,并对其抗体结合能力进行鉴定.方法：通过设计特异性引物扩增IBDV VP2蛋白的编码基因,与昆虫表达载体pMT/BiP/V5/HisA连接构建重组表达载体pMT/BiP/V5/HisA-VP2.将重组表达载体与筛选质粒粒pCoBlast共转染果蝇S2细胞后表达VP2融合蛋白,然后纯化目的蛋白,并对表达产物进行鉴定.结果：Western-blotti

会议

鸡传染性法氏囊病VP2基因S2果蝇细胞融合表达抗体检测

柔嫩艾美尔球虫C1类半胱氨酸类蛋白酶功能研究

目的：本研究旨从柔嫩艾美尔球虫(Eimer tenella)中克隆C1类半胱氨酸类蛋白酶基因，为进一步研究他们的基因表达和基因功能奠定基础。方法：选用柔嫩艾美耳球虫houghton株，利用RT-PCR的方法克隆基因的cDNA序列，并将其重组于表达载体中表达纯化。利用纯化所得蛋白制备兔抗多抗，并初步验证其活性。意义：以期通过柔嫩艾美耳球虫C1类半胱氨酸酶的克隆和表达研究，为进一步探究他们在鸡球虫入侵

会议

鸡柔嫩艾美尔球虫致病机制半胱氨酸蛋白酶基因功能

屠宰猪细环病毒Ⅰ型感染的分子流行病学调查

猪细环病毒是一种持续性感染的圆环病毒,可引起与仔猪腹泻相关及不确定的临床症状.为了解Torque teno virus 1(TTsuV 1)在屠宰猪组织中的感染状况,本研究基于TTsuV1相对高保守的5’-非编码区(5’-UTR)设计检测引物,采用PCR方法检测了2012年采集自中国河南、山东、辽宁不同地区5个猪场的180份5月龄屠宰猪组织样本,对阳性样品PCR扩增产物进行测序分析,结果表明,中国

会议

猪细环病毒Ⅰ型感染机制基因序列分子流行病学

猪流感病毒NASBA-ELISA检测方法的建立

本研究建立并优化了核酸序列依赖性扩增(NASBA)方法，结合酶联免疫吸附试验检测NASBA法扩增产物，最终建立了检测猪流感病毒RNA的NASBA-ELISA方法。

会议

猪流感病毒病原检测核酸序列依赖性扩增法酶联免疫吸附法

γ-干扰素检测技术在奶牛结核病检疫中的初步应用

本文在应用牛型提纯结核菌素(PPD)变态反应试验进行奶牛结核病检疫的基础上，引进牛结核分枝杆菌γ—干扰素检测技术，初步开展了新型检疫技术的应用研究，证明γ—干扰素技术特异性好，敏感性高，操作简便，易于标准化，可作为目前国家标准牛型PPD变态反应的平行试验，完善我国奶牛结核病检疫和净化工作的技术体系。

会议

奶牛结核病检疫γ-干扰素检测技术牛型提纯结核菌素变态反应

兽医公共卫生面临的问题及对策

近年来，随着人兽共患病、重大动物源性食品安全事件的不断爆发，严重影响了公共卫生安全、养殖业发展及动物产品出口贸易，引起各国政府、有关国际组织及行业专家的高度关注。本文列举出了目前我国兽医公共卫生面临的诸多问题，有针对性地对存在的问题研究对策，为有效解决兽医公共卫生问题提出建议。

会议

兽医公共卫生人兽共患病动物源性食品安全监测体系可追溯管理

有机奶生产技术浅谈

上世纪三十年代，发达国家就提出了有机农业、有机食品的概念，而我国的有机食品开始于1990年，有机奶的生产在近几年才有所发展。本文就有机奶的概念、有机奶品质要求和有机奶生产技术进行了简要介绍，为奶牛从业者提供参考。

会议

有机奶牛饲养管理有机奶生产技术奶品质

借鉴进口风险分析,提升养殖场动物疫病风险分析的能力和水平

动物及动物产品进口风险分析，是对进口动物及动物产品时某种疫病传入的概率及其危害(风险)进行评估、管理、交流的方法和过程，以有效降低疫病传入的风险。近年来，一些地方或养殖场根据当地实际情况，借鉴进口风险分析的理念，对养殖场存在的重大动物疫病风险进行科学评估，并取得了显著成效，确保了畜牧业持续健康发展。

会议

养殖场动物疫病风险评估进口风险分析

天津市奶牛饮水质量评价报告

本研究的目的是对天津市奶牛饮水质量进行综合评定，通过对天津市奶牛养殖重点区县武清区、北辰区、宝坻区、大港区、宁河县、静海县的6个奶牛场的地下水管道中的水、成母牛水槽中的水和犊牛饮水桶中的水采样，化验重金属、硫酸盐、硝酸盐及溶解性总固体、氟化物的含量及大肠菌群计数，结果与2001年美国奶牛营养需要NRC、国标NY5027比较得出：18个样品中重金属铅、砷、硫酸盐、磷酸盐和氟化物五项指标均合格，但武清

会议

奶牛饮用水质量标准饮水管理制度

1型鸭肝炎病毒E53株VP1基因的原核表达及多克隆抗体的制备

其他学术论文