5.Aza诱导脐带间充质干细胞向成肌细胞分化

来源 :中华医学会第十次全国妇产科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gaofeinei3
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  目的:体外证实人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)可向成肌细胞分化,为hUCMSCs治疗压力性尿失禁奠定理论基础。方法:通过贴壁法分离脐带间充质干细胞;流式细胞仪鉴定hUCMSCs;透射电镜及原子力电镜观察细胞超微结构;CCK.8试剂盒筛查不同浓度的5.氮杂胞苷(5.Aza)对hUCMSCs增殖的影响;5.Aza诱导hUCMSCs向成肌细胞分化;RT.PCR检测成肌细胞特异基因结蛋白(desmin)和重链肌球蛋白(myosin heavy chain) mRNA表达;westernblot检测desmin和myosin heavy chain蛋白表达.结果:贴壁法从脐带分离出的细胞,传至P3可得到纯化hUCMSCs;流式细胞仪发现hUCMSCs不表达造血细胞标志CD31、CD34、CD45,强表达CD29、CD90和基质受体CD44、CD105,同时极低表达与GVHD(移植物抗宿主病)相关的因子HLA.DR、CD40;CCK. 8筛查出5. Aza最佳浓度为l0umol/L;RT. PCR和Westernblot检测5. Aza诱导后的hUCMSCs表达成肌细胞特异基因及蛋白明显高于对照组。结论:5. Aza在体外可诱导hUCMSCs向成肌细胞分化,为临床修复、重建工作提供理想的种子细胞。
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